非洲爪蟾肝细胞原代培养方法.pdf

2008年 第 3卷 生 态 毒 理 学 报 Vo1．3．2008 第6期，613—617 Asian JournalofEcotoxicology NO．6 613-617 非洲爪蟾肝细胞原代培养方法 李岩 1,2，田密 1,2，刘芄岩 ，秦 占芬 ，，徐晓白 1．河北大学化学与环境科学学院，保定071002 2．中国科学院生态环境研 究中心 环境化学与生态毒理学国家重点实验室，北京 100085 摘要 ：非洲爪蟾是研究 内分泌干扰物的良好模型动物 ，其体外肝细胞可用于类雌激素活性评价、污染物代谢等研究． 论文探讨了非洲爪蟾肝细胞原代培养的方法 ，采用两步原位灌注法分离非洲爪蟾肝细胞 ，通过胶原酶 的作用使细胞 之间解离 ，后经过一系列转速的离心 ，获得纯化的肝实质细胞．研究结果表 明，采用此法获得 的细胞数量为2．5～5x106 个 ，细胞成活率达95％以上 ，纯度在95％以上 ，细胞胞体透亮 ，折光性强 ，状态 良好．培养 24h后贴壁较好 ，每 2d换液 1次 ，可培养 8～lOd，细胞可满足多种后续实验的要求． 关键词 ：非洲爪