头孢喹肟注射液在猪组织中的残留消除研究.pdfVIP

江苏农业科学 2008年第6期 头孢喹肟注射液在猪组织中的残留消除研究 徐向明，杨海峰，金礼琴，蒋春茂 (江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州 225300) 摘要：建立了猪组织中头孢喹肟的固相萃取一高效液相色谱 (SPE—HPLC)测定方法，并研究了头孢喹肟在猪组织中的残留消除 规律。组织样品用磷酸盐缓冲液和乙腈提取、离心、蒸发，然后用预先活化的C18固相萃取小柱净化。用磷酸盐缓冲液淋洗、乙腈溶液 洗脱固相萃取柱。收集洗脱液，氮气吹干后重新溶解，终溶液用高效液相色谱法分析。测定方法的LOD(检测限)和 LoQ(定量限)分 别为5～30ng／g和20～100ng／g。在0．02～2．0 g／，g添加范围内，平均回收率55．7％～79．4％，变异系数低于6．7％。健康猪按2 mg／kg剂量肌肉注射2．5％头孢喹肟注射液 ，每EI1次，连续5d，最后一次给药后0．5…123、5、7、9d分别宰杀5头猪 ，采集肌肉、脂 肪、肝脏和肾脏 ，测定组织中头孢喹肟残留量。头孢喹肟主要残留于猪的肾脏和肝脏 ，脂肪和肌肉中残 留较少，提示肾脏和肝脏为头孢 喹肟在猪体内残 留的靶组织 。停药3d后 ，所有组织中药物残留量均低于EMEA规定最高残留限量(MRL)。研究结果表明，国产硫酸 头孢喹肟在猪组织中消除迅速。建议休药期为3d。 关键词：硫酸头孢喹肟；残留；猪组织；固相萃取一高效液相色谱法 中图分类号：S828．1 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2008)06—0193—03 头孢喹肟 (cefquinome)是德国赫司特公司 (HoechstAG) 公司；涡旋混匀器，上海沪西分析仪器厂；旋转蒸发仪，德国 于20世纪80年代开发的动物专用的第四代头孢菌素类药 Heidolph公司。 物，分子式 CH N0S：。硫酸头孢喹肟于 1993年首次批准 1．3 试验动物 上市，英国英特威公司(Intervet)于 1994年上市，剂型为混悬 随机挑选健康杂交长白猪40头，体重(29．4±2．5)kg。 液和软膏。国产头孢喹肟原料及其注射液于2008年被农业 常规饲养，自由饮水，饲喂不含药物的饲料，每天定时给料2 部批准注册为国家二类新兽药。由于其抗菌谱广，抗菌活性 次。给药前饲喂1周，适应环境 ，临床表现健康。 强，并且对染色体和质粒介导的13一内酰胺酶高度稳定 ，国外 1．4 动物分组、给药与采样 已批准用于敏感菌引起的家畜呼吸系统感染，奶牛乳房炎和 试验用猪40头，随机分成8组 ，每组5只，1组为空白对 子宫内膜炎等疾病的临床治疗u 。头孢喹肟在动物消化道 照组，2～8组为试验组。除空白对照外所有试验猪颈部肌肉 内吸收利用率低 ，肌内注射、皮下注射及乳房灌注时吸收迅 注射2．5％硫酸头孢喹肟注射液，给药量 2mg／kg，每 日1次， 速，达峰快，生物利用度高 J。国外关于硫酸头孢喹肟药物 连续给药5d，在最后一次给药后 12h、1d、2d、3d、5d、7d 动力学及组织残留的研究已有不少报道 ，国内还未见相关正 和9d各宰杀一组试验猪，迅速采集肌肉、脂肪、肝脏和肾脏， 式报道。本试验以头孢喹肟原形为标志残留物，建立了猪组 一 70℃冰箱 中保存待测。对照组于试验开始时宰杀取样 织中头孢喹肟的固相萃取一高效液相色谱 (SPE—HPLC)测 待测。 定方法，并研究了猪连续5d肌注2．5％国产硫酸头孢喹肟注 1．5 组织样 品前处理 射液后组织中药物残留消除规律 ，旨在为制定休药期和临床 1．5．1 肌肉和脂肪 精密称取5g剪碎的肌肉(或脂肪)组 合理用药提供理论依据。 织于 100ml离心管中，加入20rnl磷酸盐缓冲液，5ml异辛 烷，5000r／rain均质30s，涡旋混合 1rain，用适量 pH值为5 1 材料与方法 的磷酸盐缓冲液和异辛烷洗刀头