胶体金免疫层析法检测猪瘟（强弱毒区分）抗体研究.pdfVIP

13O 广东农业科学 2012年第 7期 胶体金免疫层析法检测猪瘟(强弱毒区分)抗体研究 李华玮．郑 呜 (郑州牧业高等专科学校生物工程系，河南 郑州 450011) 摘 要：以原核表达的重组猪瘟病毒 E2蛋 白为弱毒抗原 ，以猪瘟病毒 (HCV)强毒株细胞培养物为强毒抗原 ，利用胶体金标记 技术 国内首次建立了HCV抗体检测 (强弱毒区分)的免疫层析试纸条 (双抗原夹心法)。研究结果表明，检测时只需将 80 ¨L待检 测猪血清加于加样端 20min后观察结果即可。若观察区上端仅 1条红色条带 ，即为HCV抗体 阴性 ；2～3条条带即为HCV抗体 阳 性；若出现 2条条带的位置为观察区上端和中间部位 ，即为HCV弱毒抗体阳性；若出现 2条条带的位置位于观察区上端和下端部 位 ，则为HCV强毒抗体阳性；若 出现 3条条带则HCV强弱毒抗体均为阳性。本试纸可很好地避免因试验操作造成的假阳性 、似阴 性 ，且操作简单、快速、简便、灵敏度高、特异好、不需特殊设备 、价格低廉 ，20min即可判断结果，且可区分强弱毒感染，适于基层实 验室和现场检测 关键词：猪瘟病毒 (HCV)；细胞培养 ；胶体金免疫层析 中图分类号 ：$852．651 文献标识码 ：A 文章编号：1004—874X(2011)07—0130—03 Studyon goldimmunochromatographyassay fordetection ofhogcholeraantibody LIHua-wei，ZHENG Ming (DepartmentofBioengineering,ZhengzhouCollegeofAnimalHusbandryEngineering,Zhengzhou450011，China) Abstract：RecombinationHogcholeravirusE2proteinwhichwasexpressedbyprokaryoticwasusedasattenuatedantigen，Hog choleravirus (HCV)wasservedasvirulentHCVantigen．HCV antibodytestofimmunochromatographicteststripwasestablishedforthe firsttimeinChina(doublesandwichmethod)．8OLLLporcineselqJnlwasaddedtotheendofstrips．0BeredbarnlmeantHCVantibodywas negative．twoorthreebandsmeantHCV antibodywaspositive．ItwasHCV attenuatedantibodypositiveittwobandswereon thetopan(1 middleoftheobservationarea；ItwasHCVviurlentantibodypositiveiftwobandswereonthetopandbottom oftheobservationarea；If therewerethreebands．theattenuatedand strongantibodywerebothpositive．Themethod coulddiscriminatebetween vi,ulentair】 attenuatedstrain，whichwasmoresensitiveandspecificthanothermethodsandfitforclinicaldiagnosisofHCV． Keywords：hogcholeravirus；cellculture；goldimnmnochromatographyassay 猪瘟病毒属于黄病毒科瘟病毒属，有囊膜 、耐热 、不