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ISSN1007—8738细胞与分子免疫学杂志(Chin』 2 Q ! ( 305
· 论著 · 文章编号：1007—8738(2005)03—0305—04
Red蛋 白抗血清的制备及其亚细胞定位研究
张晓楠 ，陈苏民 ，罗二平 ，黄 勇 ，柴玉波 ，李云峰 ，陈南春
(第四军医大学：基础部生物化学与分子生物学教研室 ，生物医学工程系，陕西 西安 710032)
Preparationofanti·Redantiseraandits 别占菌体总蛋白量的40．3％、49．2％和 73．4％。3种抗血清
的效价约为 1：2000。Westernblot分析显示抗血清具有较好
subcellularl0calizati0n
的特异性。结论：成功地获得 Bet、Exo和Gam3种蛋白，并
ZHANG Xiao—llall‘CHEN Su—min ，LUO Er-ping ， 分别制备 r相应的抗血清。使用这3种抗血清 ，检测了3种
，
蛋白在真核细胞中的表达和定位，为研究 Red蛋白的同源重
HUANG Yong ． CHAI Yu—bo ‘ LIYun-feng，‘CHEN
，
组奠定了基础。
Nan—chun ‘
[关键词] Red蛋白；多克隆抗体；瞬时转染
DepartmentofBiochemistryand MolecularBiology． Faculty of
[中图分类号] Q754 [文献标识码] A
Bio—medicine Engineering，Fourth Military MedicalUniversity，
Xi’an710032．China
近年来的研究发现，在原核生物中，来源于入噬
[Abstract] AIM：Topreparerabbitanti—Redantisera．
METHODS：Thebet，exoandgam genesoflambdaphage 菌体的Red重组系统可加速 目的基因的重组过程。
wereamplifiedbyPCR frOm genomicDNA and cloned into 若将其引入真核基因的基因打靶技术中，可加速 目
the expression vectorpDH2， respectively． Red proteins 的基因的重组过程，显著缩短基因打靶的u,／I司，降低
wereinduced to expressat42oC． The expressed proteins 建立遗传修饰动物模型的成本，使基因打靶技术能
wereanalyzedbyPAGE andthin—layerscanning．Theanti— 更广泛的应用于生命科学研究的各个领域中，为功
serawere prepared by immunizing rabbitswith the three 能基因组计划的顺利实施提供更快捷的一个技术平
Redproteins，respectively．Thetitersandspecificitiesofthe 台。但 目前这一技术仍处于理论探索阶段，在真核
antiseraweredetected byWesternblot．RESULTS：Beta，
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