RP—HPLC法测定大鼠血浆中的灯盏乙素含量.pdfVIP

天津药学 Tianjin Pharmacy 2008年 第20卷第6期 9 3．3 电子水分计法操作简便，检测时间短，检测结果 参考文献 与法定方法无显著性差异，可作为测定三 自儿散水分 中国药典·一部·00·附录 的检测方法 。 RP—I-IPLC法测定大鼠血浆中的灯盏乙素含量 吴毅彦 ，高立勤 ，唐素芳 ，赵陆华 (1．天津市药品检验所，天津 300070；2．中国药科大学分析测试中心，南京 210009) 摘 要 目的：建立大鼠血浆中灯盏乙素的RP—HPLC测定法。方法：RP—HPLC法，采用迪马c8柱 (250mm×4．6 mm，5Ixm)，甲醇 一乙腈 一0．01mol／L乙酸铵溶液(pH3．5)(22：8：70)为流动相，流速为 1．0ml／min，检测波长335nm， 柱温30℃。结果：线性范围为0．025—20．0mg／L(r=0．9999)，最低定量浓度为25ng／ml。结论：建立的大鼠血浆中灯盏 乙素的反相液相色谱测定法灵敏、准确，可用于大 鼠血浆中灯盏乙素浓度测定。 关键词 灯盏乙素，灯盏花素注射液，RP—HPLC 中图分类号：R927．2 文献标识码：A 文章编号：1006—5687(2008)06-0009-02 灯盏花素 (breviscapine，BvP)是从菊科植物短葶 (22：8：70)为流动相 ；流速为 1．0ml／min；检测波长 飞蓬 [灯盏细辛，Erigeronbreviscapus(Vant)Hand— 335am；柱温 30℃。 Mazz]全草中提取的黄酮类有效成分，是灯盏乙素和少 2．2 大 鼠药动学试验设计 取大鼠24只，分为3组， 量灯盏甲素的混合物，主要有效成分为灯盏乙素 (4， 于给药前及给药后5、15、30、45min和 1、2、3、4h，三组 5，6一三羟基黄酮 一7一葡萄糖醛酸苷，scutellarin，I)， 大鼠分别间隔腹主动脉取血 2ml，置枸橼酸钠涂布的 具有扩张血管，改善脑血液循环，增强脑血流量，降低 离心管中，2000r／min离心 10min，分取血浆，一20cI= 血管阻力和抗血小板凝集作用，临床主要用于治疗脑 冰冻保存待测。DAS软件计算药动学参数。 血栓形成、冠心病和心绞痛等心脑血管疾病 。本实 2．3 血浆样品处理 精密量取血浆0．2ml，置 10ml 验建立了一种以黄芩苷 (II)为内标的反相高效液相 具塞试管中，加入 内标溶液 (5 g／lnl黄芩苷 甲醇溶 色谱法，用于测定大鼠血浆中灯盏乙素原形药物的 液)5Otxl，1mol／LH3PO 溶液 100 ，涡旋混匀，加人 含量。 提取溶剂乙酸乙酯4ml，涡旋5min，3000r／min离心 1 仪器与试验材料 10min。分取上层有机相，于3O℃氮气流下吹干，残 1．1 仪器 岛津2010型高效液相色谱系统。 留物用 100Ixl甲醇 一水(1：1)溶解 ，涡旋 1rain，离心 1．2 试药 灯盏花素注射液 (5mg／2ml，哈尔滨三联 后吸取 50 l进样分析。按 内标标准曲线法以峰面积 药业有限公司，批号051001A)；灯盏乙素对照品(批号 比进行定量测定。 200605)和黄芩苷对照品(批号 200514)均由中国药品 2．4 灯盏乙素对照品溶液 精密称取灯盏乙素对照 生物制品检定所提供。甲醇、乙腈(色谱纯，天津康科 品约 10mg，用甲醇溶解并定量稀释制成 100 g／ml溶 德试剂有限公司)，乙酸 乙酯、冰醋酸、乙酸铵 (分析 液，一20℃保存，备用。 纯，市售)，水(二次重蒸水，自制)。 2．5 黄芩苷内标溶液 精密称取黄芩苷对照品约 1．3 试验动物 SD大 鼠，雄性，体重 180～220g，由 10mg，用 甲醇溶解并定量稀释制成 5 g／In1溶液， 中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供， 一 20℃保存 ，备用。 动物许可证SCXK(津)