离子排斥色谱法测定酱油中的有机酸.pdfVIP

第十一届全国离子色谱学术报告会论文集 浙江杭州.2006.11.28-30 65 离子排斥色谱法测定酱油中的有机酸 * 王学文，原小寓，于泓P P （哈尔滨师范大学化学系，黑龙江哈尔滨，150025） 摘要：研究了非抑制型离子排斥色谱法分离测定酱油中多种有机酸。以 Shim-pack SCR-102H 柱为分 离柱，选用对甲苯磺酸＋乙腈为淋洗液，考察了淋洗液浓度、色谱柱温度及淋洗液中乙腈含量对分离 和测定有机酸的影响。通过实验确定最佳的色谱条件：2 mmol/L p- 甲苯磺酸＋乙腈（v/v，91/9 ）淋 洗液，流速 1.0 mL/min，柱温 50℃。方法对所测有机酸的检出限在 0.06～1.05 mg/L 之间，相对标准 偏差在 3.3 ％以下（n = 5 ），加标回收率在 96.5 ％～100.6%之间。 关键词：离子排斥色谱法；有机酸；酱油 酱油是一种有色的调味品，酱油中的有机酸对改善酱油的滋味有帮助，是整体风 [1] 味组成的一部份P P 。每种有机酸的差异，直接影响到酱油的口感与质量。酱油中的有机 酸含量多以总酸表示，但为满足酱油制造工艺及质量的鉴别，应了解各种有机酸的具 体含量。传统的有机酸测定多用化学法，但易受干扰，且每次只能测一种有机酸，误 差也较大。气相色谱法须将有机酸酯化后才可测定。目前，用离子排斥色谱法测定有 [2~5] 机酸已有很多报道P P ，但对色素含量较高物质中有机酸的测定报道很少。本文采用非 抑制型离子排斥色谱法测定了酱油中的有机酸，无需复杂的样品前处理，方法简便可 靠，可以满足酱油中有机酸定量分析的要求。 1 实验部分 1.1 仪器和试剂 岛津公司LC-20A型高效液相色谱仪，配有CDD-10AB VPB 电导检测器、LC-20ADB B SP 输液泵、CTO-20AC柱温箱、SIL-20A 自动进样器、SCL-10A VP系统控制器和LCsolution Ver 1.X色谱工作站；0.22μm过滤膜（天津）；Simplicity纯水系统（美国Millipore公司）； DOA-P504-BN型无油真空泵（美国IDEX公司）；0.22μm过滤膜（天津）。 乳酸、乙腈为色谱纯试剂，p- 甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、甲 酸、乙酸、NaOH 为分析纯试剂，所用水均为电阻率 18.2 M Ω·cm 的超纯水。 1.2 色谱条件 色谱柱：Shim-pack SCR-102H 型离子排斥色谱柱（7 μm ，8.0 mm i.d. ×300 mm，岛 津公司）；流动相：2 mmol/L p- 甲苯磺酸＋乙腈（v/v，91/9 ）；流速：1.0 mL/min；柱箱 温度：50℃；电导检测器；进样量：20 μL 。 2 结果与讨论 2.1 色谱条件的选择 2.1.1 淋洗液浓度的选择 实验中，首先不加入乙腈，仅用 p- 甲苯磺酸作淋洗液，浓度由 0.5 mmol/L 增加到 3.0 mmol/L，测定了 6 种有机酸的保留时间（见图 1）。由图 1 可知，随着 p- 甲苯磺酸浓 度的增加，6 种有机酸的保留时间均不同程度增长。在 p- 甲苯磺酸浓度较低时，柠檬酸 与酒石酸、乳酸与甲酸的保留时间接近，色谱峰重叠。随着淋洗液浓度增大，各种酸的 分离得到改善，但检测灵敏度降低。综合考虑，本实验选定 p- 甲苯磺酸浓度为 2.0 mmol/L 。 2.1.2 色谱柱温度的选择 第十一届全国离子色谱学术报告会论文集 浙江杭州.2006.11.28-30 66 固定其它条件，将