铁棍山药微型块茎诱导形成及其萌发的研究.pdfVIP

STUDIESoNINDUCTIoNAND oFD凡怂℃移RE4 oFMICRoTUBERS刀V玎豫D 唧伽ⅨTHUNB．CV．TIEGUN ADissertationSubmiRed totheGraduateSchoolofHenanNormal University ofthe inPartialFulfillment Requirements forthe ofMasterofScience Degree By yipeng Wang Li Supervisor：Profimingiun 2013 May 摘要 为了探索更加有效的铁棍山药繁殖新途径，解决生产上由于长期营养繁殖造成的病 Thunb． 毒感染严重、种质退化、产量下降等问题，本文以铁棍山药(Dioscorea opposita CV．Tiegun)脱毒苗的带芽节段为试材，对其微型块茎的诱导形成进行了系统的研究，探 讨了不同诱导方法(一步法，二步法，三步法)对微型块茎诱导形成的影响，同时对微 型块茎的管内萌发也进行了初步的研究。研究结果如下： 1．不同诱导方法对铁棍山药微型块茎的诱导效果不同，以一步振荡诱导法和三步 循环诱导法相结合最为适宜。 1)首次建立了铁棍山药微型块茎形成的一步振荡诱导法。该方法以MS+60 g-Ld d左右可诱导形成微 蔗糖的液体培养基为诱导培养基，进行快速振荡(120rpm)培养，35 型块茎，诱导率可达100％。该方法可控性强、简易、高效，既可作为研究山药微型块 茎诱导形成机理的一个理想模型，又可用于山药微型块茎的规模化生产。 2)建立了铁棍山药微型块茎诱导的。改良两步法一，较前期本研究室建立的“普通 两步法诱导的单株微型块茎略有提高，但诱导时间并没有缩短。 3)首次建立了铁棍山药微型块茎形成的三步循环诱导法。具体步骤为：(1)将铁 棍山药节段在MS+0．005TDZ+30 d；(2)将上 mg·L‘1 g·Lo蔗糖的培养基中静置培养30 述得到的植株接种于MS+30 d；(3)将第二步得到的 g．L。1蔗糖的培养基中振荡培养15 d，再静置培养38d。当接 植株接种于MS+60g·L以蔗糖的培养基中先慢速振荡培养7 种密度为3个／瓶时，90d后，单株微型块茎的数目为3．56；当接种密度大