红树林植物木榄水通道基因的克隆和表达.pdfVIP

维普资讯 438 植物生理学通讯 第43卷 第 3期，2007年 6月 红树林植物木榄水通道基因的克隆和表达 祝艺懿 ，韩渊怀 ，李正国 ，陈国平 ，DonaldGrierson，殷幼平 重庆大学生物工程学院基因工程研究中心，重庆市高校功能基因及调控技术重点实验窄，重庆400044：PlantSciences Division，UniversityofNottingham ，Britain 提要：根据植物水通道基因保守区设计简并引物，采用RT—PCR方法，从木榄树叶中分离出水通道基因的eDNA片段； 3’RACE获得3’端eDNA序列；再经5’AR CE获得5’端部分eDNA序列，命名为P，P2，GenBank登录号为EF126757。该 基因全长843个碱基，编码281个氨基酸，具有典型的植物水通道基因结构。该基因编码的蛋白质与含羞草(PPI2；5)、欧 洲葡 (PIP)、拟南芥(PPI3)等水通道蛋白的同源性分别为90％、91％、88％。Northern杂交分析表明，该基因在木榄树不 同器官中的表达差异明显：根部有较高的表达水平，茎部较弱，而在叶中只能检测到微弱的信号。 关键词：木榄；水通道基因；NPA盒；基因表达 CloningandExpressionofaNewAquaporinGenefrom Bruguieragymnorhiza L．)Lam ZHUYi—Yi，HAN Yuan·Huai，LIZheng·Guo，CHEN Guo—Ping，DonaldGrierson，YIN You．Ping KeyLaboratoryofFunctionalGeneandRegulationTechnologies，ChongqingMunicipalEducationCommission，GeneticEngi— neeringResearchCente~CollegeofBio-Engineering，ChongqingUniversity,Chongqing400044，China；。PlantSciencesDivision， Univers Nottingham,Britain Abstract：Theaquaporin(AQP)geneofBruguieragymnorhiza，namedP，P2(plasmamembraneintrinsic protein2)，wasclonedfrom leafbythemethodsofRT．PCR，3。rapidamplificationofcDNAends(RACE)and 5’RACE usingdegenerateprimersdesignedaccordingtotheconservedregionofaquaporinproteinfamily． GenBankaccessionnumberwasEF126757．Thisgenecontainedanopenreadingflame(oRF)of843bp codingapolypeptide281aminoacids．1hepredictedaminoacidsequenceofPIP2show 90％ sequenceidentity toAQPPIP2；5(Mimosapudica)，91％toPIP(Vitisvinifera)，88％toPIP3(Arabidopsisthaliana)，respectively． Northern·hybridizationshowedthathteexpressionofPIP2wassignificantlydifferentndifferentorgans．The trna scriptionlevelofP，P2inrootwassignificna tlyhigherhtna htatinstem na dleaf,respectively ． Keywords：Bruguieragymnorhiza；aquaporingene；NPA—box；geneexpression 植物水通道蛋白(aquaporin，AQP)在植物体 少。水通道蛋白家族具