对禽流感H5N1灭活疫苗不同免疫方式诱导的免疫应答及异亚型保护研究.pdfVIP

· 184 · 国际生物制品学杂志2011年 8月第34卷第 4期 IntJBiologieals．Au 8t2011，Vo1．34．No．4 · 论 著 · 对禽流感 H5N1灭活疫苗不同免疫方式诱导 的免疫应答及异亚型保护研究 李冬梅 许文婷 易应磊 杨忠东 摘【要】 目的 观察禽流感H5N1灭活疫苗以不同方式免疫后诱导的免疫应答及抗异亚型病毒 攻击的保护作用。方法 将 H5N1灭活疫苗分别通过腹腔和滴鼻方式免疫 BALB／c小 鼠，同时以PBS 作为对照；免疫后分别以PR8和H9N2病毒攻击 ，观察小鼠的体重变化和生存情况。采用ELISA对各组 小鼠攻毒后不同时间的血清IgG及其亚类水平进行动态检测；流式细胞仪检测脾淋巴细胞亚群情况。 采用t检验对各组数据进行比较。结果 PR8和H9N2病毒攻击后，各组小鼠体重均下降，但疫苗组小 鼠于后期体重恢复正常，存活率分别为 100％和70％～80％，而PBS组小鼠则全部死亡。无论以何种方 式免疫 ，疫苗组的特异性IgG及其亚类水平均明显升高，其中以IgG2a水平升高更为明显。攻毒后疫苗 组小鼠脾 CIM 与CD8T淋巴细胞比值出现下降(t=6．8017，P0．01)；滴鼻免疫组与腹腔免疫组相比 降低更明显(t=3．9701，P0．05)。结论 H5N1疫苗免疫原性良好，可诱导较高水平的特异性抗体产 生，诱导的抗体亚类以IgG2a为主。两种免疫方式均可对小鼠提供很好的异亚型保护，而滴鼻免疫能够 诱导更强的CD8T细胞应答。 【关键词】流感病毒A型，H5N1亚型；流感疫苗；注射，腹腔内；投药，鼻内；交叉保护作用 Observation ofimmune responses and heterosubtypic protection induced by an inactivated avina influenzaH5N1vaccinein mice L／Dong—mei，XU Wen—ting，YIYing—lei，YANG Zhong—dong． No．4 ResearchLaboratory，ShanghaiInstituteofBiologicalProducts，Shanghai200052，China Correspondingauthor：YANG Zhong一如 ，Email：zdyang@ sio ．com A【bstract】 0bjective Toobserveimmuneresponsesandheterosubtypicprotectionelicitedbyan inactivatedinfluenzaH5N1vaccinewithdifferentimmunizationroutesinmice．M ethads BALB／cmicewere intraperitoneallyinjectedorintranasallyimmunizedwiththeinactivatedH5N1vaccine．themiceadministered withPBSwereusedascontro1．Weightlossandsurvivalinmicewereobserved afterPR8oraH9N2 virus challenge．Serum specificIgGantibodyanditssubclassesweredetectedbyELISA kits．RatiosofCD4 ／CD8 lymphocytesinspleensofmicewereassayed．The t-testwasused in the comparison ofdifferentgroups． Results Afterchallenge，weightlosswasfoundinallgroups，buttheweightofmiceinvaccinationgroups returnedtonormallater．ThemiceinPBS groupsalldied．Thevaccinatedmicewerecompletelyprotected againstPR8andpartlyprotectedagainstH9N2viurs．ThelevelofIgG antibody increased significantlyafter vaccination，andt