发酵谷物中产L-赖氨酸益生菌的筛选与鉴定.pdfVIP

232 201o，Vo1．31，No．21 良 晶科 学 ※生物工程 发酵谷物中产 一赖氨酸益生菌的筛选与鉴定 骆超超 ，高学军 ，王青竹，于 微 ，刘晓飞，卢志勇，乔 彬 (东北农业大学 乳品科学教育部重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150030) 摘 要：为了扩展高产L一赖氨酸菌种在食品、饲料中的应用与提高微生物发酵生产L一赖氨酸的安全性，从面包、 麻花、馒头、发面饼、大列巴、黏豆包发酵谷物的生面团及米酒、白酒曲+-分离培养出66株产L一赖氨酸益生 菌菌株。将这些菌株进行培养、发酵，并利用高效液相色谱技术检测其发酵液中 一赖氨酸的含量，筛选出发酵 液富含L．赖氨酸的菌种两株。最后利用 16SrDNA分析及Blast分析、特异性引物PCR技术鉴定出这两株菌为肠膜 明串球菌ATCC8293和德氏乳杆菌ATCCBAA一365。其发酵液中L一赖氨酸含量分别为52．33、46．09g／L，较其他 菌种相对较高。 关键词：发酵谷物；L 赖氨酸；益生菌；高效液相色谱；16SrDNA；PCR ScreeningandIdentificationofL—-lysine—p·roducingProbiotics LUOChao—chao，GAOXue-jun ，WANGQing—zhu，YUWei，LIUXiao—fei，LuZhi—yong，QIAOBin (KeyLaboratoryofDairyScience，Ministry ofEducation，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin 150030，China) Abstract：ThepresentstudyaimedtoexpandtheutilizationofL—lysine—producingstrainsinfoodandnaimalfeedsnadraise thesecurityofL-lysineproductionbymicrobialfermentation．Intotal，66strainshavingtheabilitytoproduceL—lysinewere isolatedfrom commerciallyavailabledoughsforthemakingofbread，frieddoughtwists，steamedbread，steamedcakeand Russianstylebreadnadkojisofrthemakingofricewinenaddistilledliquor．Thesesrtainswerecultured，andhtequantitation ofL-lysinecontentinmedium attheendofculturewascarriedoutusingHPLC．Twoofhte66isolatedstrainswerefoundto producehigheramountofL—lysineandthecontentsofL—lysineintheresultantfermentationbrothswere52．33g／Land 46．09g／Lrespectively．Using 16SrDNA sequenceandBlastnaalysesandspceificprimerPCRtechnique．hteywereidentified asLeuconostocmesenteroidesATCC 8293na dLactobacillusdelbrueckiisubsp．bulgaricusATCCBAA一365． Keywords：fermented cereals；L—lysine；probiotics；high—performanceliquidchromatography； 16S rDNA； specificPCR 中图分类号：Q93．331 文献标识码：A 文章编 号：1002—6630(2010)21—0232—04 赖氨酸(1ysine)的化学名称为2,6-二氨基己酸，有 型、 前所使用 的高