日本血吸虫精氨酸酶编码基因eDNA的分离和序列分析.pdfVIP

维普资讯 中山医科大学学报(AcadJSUMS)，2001．22(2)：85～88 · 基础研究 · 日本血吸虫精氨酸酶编码基因eDNA的分离和序列分析 吴忠道，郑亦男，徐 劲，余新炳 (中山医科大学寄生虫学教研室，广东 广州 510089) 摘 要：【目的】分离和鉴定 日本血吸虫(Schisto~maia加 icm，s7)新基因。方【法】应用免疫学方法筛选 s7eDNA 文库获得阳性克隆；通过PCR直接序列测定技术 ，表达序列标签(EST)同源性检索对阳性克隆插入片段进行鉴定：采用亚克 隆技术及生物信息学等技术，对获得的日本血吸虫精氨酸酶编码基因序列进行结构与功能的分析。 【结果】获得了一个含 l061bp外谅插入片段的阳性克隆，其 eDNA序列舍有一十840bp的阅读框，编码 279个氨基酸，属精氨酸酶家族，与国际蛋 白质库中的酵母、蛙、人和大鼠精氨酸酶序列的同源性分别为44％，5O％，51％，53％和54％。 【结论l获得了编码 日本血吸虫 精氨酸酶编码基 因全长 cDNA，为 日本血吸虫精氨酸酶基因功能的研究奠定丁基础。 关键词 ：日本血吸虫；精氨酸酶：序列分析 ，eDNA 中图分类号：R3832 文献标识码：A 文章编号：1000—257X(2001)02—0085—04 IsolationandSequenceAnalysisofthecDNA Encoding Schistosomajaponicum Arginase WU Zhong-dao，ZHENGYi—ni~12，XU Jing．YIJXin—bing (Deparrme／ttofParasitoLogy，SunYat—senUniversityofMedicalSelenc~，Guangzhou510089，China) Absttact：O【bjectives】ToisolateandidentifynovelgenesofSchistosomajaponicum(SJ)fromeDNAli— brary 【Methods】eDNAcloneswerescreenedfromSJcDNAlibrarybyimmunologicalmethod，theinsertsof positiveeDNA cloneswereidentifiedbyPCRdircetde esquencingandhomologoussearchingofEST，theeDNA sequenceencodingSJarginasewasanalyzedbythesubcloningandbioinformatics．【Results】Thepositive eDNA clonewith1061bpinsertwasioslatedfrom S．icDNA library，whiehsequenceoftheinesrtincludde a OREwith840bp，andtranslatde into279aminoacidresidues．ThededucedpmteinWaSsimilartOtheraginaSe fma ily，thehomologyatma inoacid sequencelevelwas44％，50％ ，51％ ，53％ and54％ withschizosacch— arora ． ycespombe(fissionyeast)raginaes，xenopuslaevis(africna clawedfrog)raginase，homosapiens(human) arginaesiiprecurosrandrattu$noruegicus(rat)arginaseiiprecursorrespectively．【Conclusion】Thefull—length cDNAsequenceencodingSchistosomajaponicumarginasewasclonde，whichgavethebasisforfurtherstudying ofSchistoso