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第22 卷 第6 期 辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Vol.22, No.6 2004 年12 月 J. Radiat. Res. Radiat. Process. December 2004 紫外光照射下富勒醇对细胞的防护作用 1 2 2 1 2 1 1 1 李宇国 倪 瑾 韩 玲 赵群芬 高 福 李晴暖 徐晶莹 李文新 1 （中国科学院上海应用物理研究所纳米生物医药研究室 上海 201800 ） 2 （第二军医大学放射医学教研室 上海 200438 ） 摘要 为了解紫外辐射下富勒烯衍生物富勒醇对细胞的生物效应，利用四唑盐比色实验（MTT ）法研究了富勒 醇对紫外辐照细胞的存活率影响，紫外辐照细胞时富勒醇对细胞超氧化物岐化酶（SOD ）和氧化产物丙二醛 （MDA ）的影响，同时比较了C60−PVP 对紫外辐照细胞的辐射生物效应。结果表明，富勒醇能够有效的防护紫外 辐射对细胞造成的损伤，其机理可能是富勒醇能够吸收紫外辐照产生的自由基，使细胞膜不被紫外辐照损伤。 关键词 富勒烯，紫外辐照，辐射保护 中图分类号 O644 富勒烯被喻为吸收“自由基的海绵”，它的很 学系航海医学教研室馈赠；富勒烯，武汉武大三维 多衍生物具有清除自由基的特性。在各种各样的富 碳簇材料有限公司产品，纯度99.9% ；RPMI1640 ， 勒烯衍生物中，多羟基化合物富勒醇（C (OH) ）是 美国Gibco BRL 公司；新生小牛血清，杭州四季青 60 x 一种重要水溶性衍生物。其分子结构保留着一半的 公司；MTT （溴化四甲基唑），Sigma 产品；二甲亚 共轭双键（约10—15 个π 电子组成的共轭体系）， 砜，分析纯，上海化学试剂一厂；胰蛋白酶 与其前体富勒烯分子相比大大降低了它的毒性。其 （EC3.4.21.4 ），Difco 产品；其它试剂均为分析纯 分子结构上共存有适中电子亲和性基团和烯丙基结 试剂；SOD，MDA 和•OH，O2−•测定试剂盒，南京 • −• 建成生物有限公司产品。 构，可有效地清除OH 和O2 ，该特点可使其在生 物体系中作为自由基清除剂和水溶性抗氧化剂[1] 。 1.2 主要实验仪器 目前，对富勒烯的细胞生物效应的研究主要集中在 CO2 恒温孵箱（SHEL−LAB ，Japan ）；紫外灯 光辐射生物效应上，大量的研究工作揭示，在可见 （上海泰诺电器厂，20W ）；752 紫外分光光度计（日 光照射下，富勒烯具有很强的光致毒性[2,3] 。对于紫 立）；电动匀浆器（TEFLON ，USA ）；超低温离心 外光照射下的保护作用鲜见报导[4,5] 。紫外辐射可以 机(UNIVERSAL 32R,Germany) ；精密数显酸度计 产生自由基等活性物种，目前研究的紫外防护剂， （PHS−3TC ，上海天达仪器厂) ；酶联检测仪 如磷酸化的氨巯基化合物WR−2721 、半胱胺和青霉 （DG5031 型，南京华东电子集团医疗装备有限责 素胺等可以清除自由基[6]、猝灭单线态氧分子物种， 任公司）。 并可与该过程的激态分子反应，在体外有显著的防 护紫外辐射的作用。本实验研究了富勒醇在紫外光