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维普资讯 第34卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 特刊 2006年9月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry S10一S14 反相高效液相色谱／质谱法同时测定鸡肉中 5种喹诺酮药物残留 彭 涛 雍 炜 安 娟。 储晓刚 唐英章 李重九 (中 农_、】大学理学院，北京 100094) (中国检验检疫科学研究院，北京 100025) 摘 要 采片】反相高效液相色谱／四级杆串联质谱 (RP．HPLC／MS／MS)同时测定鸡肉中的5种喹诺酮药物 (quinolones，QNs)。均质后的鸡肉样品采用磷酸盐缓冲溶液和乙腈的混和溶液提取。提取液经正己烷液-液 分配(LLP)去除脂肪后，用c，固相萃取(SPE)柱净化，氨化甲醇洗脱，洗脱液用氮气吹干，流动相定容后，分 析物采用 LC／MS／MS电喷雾电离(ESI)，正离子 ，多反应监测 (MRM)模式检测，外标法定量。在添加浓度 2．5一l0 kg范围内，5种QNs的回收率在79．8％一95．I％之间；相对标准偏差(RSD)均小于 I1．7％。环 内沙星、丹诺沙星、恩诺沙星检出限(LOD)为0．5 g／kg，沙托沙星为 1．0 g／kg，氟甲喹为0．1 g／kg。 关键词 反卡H高效液相色谱，四级杆串联质谱，喹诺酮药物，鸡肉 引 言 喹诺酮药物(quinolones，QNs)是继磺胺药之后迅速发展起来的一类十分重要的人工合成抗菌药 物。QNs抗菌谱广，组织穿透力强，高效低毒，抗菌作用力是磺胺药的近千倍，并且价格低廉，在医学和 兽医学中应用广泛。作为兽药，QNs主要用于预防和治疗畜禽及鱼类疾病，少量使用还具有一定的促生 长作用。但是该类药物在动物体内消除缓慢，过量使用或使用不当会造成动物源性产品中药物残留；人 体摄入后可能导致细菌耐药性问题，以及对中枢神经系统造成不 良反应。。J。欧盟规定了QNs的最高残 留限量：恩诺沙星和环丙沙星共 30 g／kg，丹诺沙星300 kg，沙拉沙星 10I~g／kg，氟 甲喹50 g／kg。 我国从2003年开始，在 《中华人民共和园进／出口动物及动物源性食品残留物质监控计划》中增加了对 环丙沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星和氟甲喹残留量的检测内容。 关于QNs的检测方法较多，有微生物方法 I、化学发光法 、薄层色谱法 J、毛细管电泳法 等，使 用最多的是反相高效液相色谱 (RP—HPLC)配置紫外或荧光检测器测定方法_6’。该方法灵敏度较高， 能够满足快速筛选监测需要，但由于缺乏结构信息，不能作为确证和执法依据。近年来国际上发展起来 的色／质联用技术解决了这个问题 ，气相色谱／质谱 l、液相色谱／质谱技术开始应用于QNs的测定。目 前国内关于这方面的文章报道较少。气相色谱／质谱检测需要进行衍生化，操作繁琐；Delepine等 建 立了QNs的液相色谱／质谱测定方法，但他采用的是大气压化学电离 (APCI)、选择离子监测 (SIM)模 式，结构信息并不丰富，灵敏度也不高；Johnston_l叫和vanVyncht… 等都采用了电喷雾电离 (ESI)、多反 应监测(MRM)模式检测，但样品处理步骤复杂，重现性不易控制。 本研究在文献方法的基础上，采用反相高效液相色谱／四级杆串联质谱 (RP—HPLC／MS／MS)同时测 定5种QNS，优化并简化了鸡肉中5种QNs同时提取和固相萃取净化技术，方法灵敏度优于欧盟限量 要求和文献方法报道。 2 实验部分 2+1 仪器与试剂 Waters2695液相色谱仪 (美国Waters公司)；QuattroUltimaPtTandemMS／MS质谱系统 (英国 Micromass公司)；超声波水浴 (昆山市超声仪器有限公司)。色谱柱：XTerraMSC…2．1mm×150mm i．d．，5 m(美国Waters公司)。ENVICC 固相萃取柱，500mg，(美国Supelco公司)。 2005-08-15收稿；2005-09．30接受 本文系国家 “五”食品安全重大科技专项资助项 目(No．2001BA804A18) 维普资讯 特 刊