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紫外可见分光光度计及其在临床检验中的发展和应用 摘要：紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器，无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域，还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门，紫外可见分光光度计都有广泛而重要的应用。紫外可见分光光度计有着较长的历史，其主要理论框架早已建立，制作技术相对成熟。在临床检验中的应用更是广泛，现在国内几乎每个乡镇医院的检验科都有紫外可见分光光度计，构成紫外可见分光光度计的光、机、电、算等任何一方面的新技术都可能再推动紫外可见分光光度计整体性能的进步。在追求准确、快速、可靠的同时，小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代紫外可见分光光度计新的增长点。关键词：紫外可见分光光度计，检验医学 l9世纪50年代，首先出现了用千目观比色法的纳氏(Nessler)比色管，不久有杜氏(Duboscq)比色计，后者一直沿用到本世的40年代。1911年，使用硒光电池的Berg比色计制成。而这种光电比色计是分光光度计的雏形和基础。本世纪3O年代看，由于秉灯、氢灯和各种棱镜，光学器材和电学器材的发展，美国Beckman公司的第～ 台分光光度计终于在1941年问世。至60年代，紫外可见光分光光度计(UV—V 计)基本上取代了光电比色计 1957年，美国Technicon公司按照Skeggs医生的方案，推出了世界上第一台自动化的临床生化分析仪。60年代以后．各种自动化分析仪层出不穷。特别是70年代起，各种分光光度计与计算机联姻，明显地扩大了仪器功能 现在，分光光度计作为综台光学、电学(尤其是计算机技术)和精密机械学的发展和应用， 已广泛应用于医学、食品、工业和农业等许多领域。其中以uV—V计系列彰响最广、应用最普遍， 并且还是其他分光光度计(如原子吸收分光光度计)的基础。紫外可见分光光度法具有仪器价格低廉适用性广泛，尤其是采用微机控制以来，该技术得到了突飞猛进的发展，成为检验医学中必备的一个常规仪器，本文将重点介绍uv—v 计的原理，结构，特点及其在临床检验医学中的发展和应用。 紫外可见分光光度计的发展 （一）基本情况 1.紫外可见分光光度计简介　1852年，比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理论基础，这就是著名的比尔朗伯定律。1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将此理论应用于定量分析化学领域，并且设计了第一台比色计。到1918年，美国国家标准局制成了第一台紫外可见分光光度计。此后，紫外可见分光光度计经不断改进，又出现自动记录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器，使光度法的灵敏度和准确度也不断 提高，其应用范围也不断扩大。 2.原理 分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。 根据Lambert-Beer 定律：A=εbc，（A 为吸光度，ε 为摩尔吸光系数，为液池厚度，c 为溶液浓度）可以对溶液进行定量分析。 3.结构 无论哪一类分光光度计都由下列五部分组成，即光源、单色器、狭缝、样品池，检测器系统。 (1)光源 要求能提供所需波长范围的连续光谱，稳定而有足够的强度。常用的有白炽灯(钨比灯、卤钨灯等)、气体放电灯(氢灯、氘灯及氙灯等)、金属弧灯(各种汞灯)等多种。钨灯和卤钨灯发射320～2000nm连续光谱，最适宜工作范围为360～1000nm，稳定性好，用作可见光分光光度计的光源。氢灯和氘灯能发射150～4O0nm的紫外光，可用作紫外光区分光光度计的光源。红外线光源则由纳恩斯特(Nernst)棒产生。汞灯发射的不是连续光谱，能量绝大部分集中在253．6nm波长外，一般作波长校正用。 (2)分光系统(单色器) 单色器是指能从混合光波中分解出来所需单一波长光的装置，由棱镜或光栅构成。用玻璃制成的棱镜色散力强，但只能在可见光区工作，石棱镜工作波长范围为185～4000nm，在紫外区有较好的分辨率而且也适用于可见光区和近红外区。棱镜的特点是波长越短，色散程度越好。所以用棱镜的分光光度计，其波长刻度在紫外区可达到0．2nm，而在长波段只能达到 5肿。有的分光光系统是衍射光栅，即在石英或玻璃的表面上刻划许多平行线，刻线处不透光，于是通过光的干涉和衍射现象，较长的光波偏折的角度大，较短的光波偏折的角度小，因而形成光谱。 (3)狭缝 狭缝是指由一对隔板在光通路上形成的缝隙，用来调节人射单色光的纯度和强度