电项针疗法对大鼠脑缺血再灌注模型HIF-1α及HIF-1α mRNA表达的影响.pdf

针灸临床杂志2009年第25卷第03期 · 33 · 实 验 研 究 电项针疗法对大鼠脑缺血再灌注模型 HIF一1及 HIF一10cmRNA表达的影响 杨续艳 ，郭淑颖2，王 锐3，陈春林4 (1．黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150o4o；2．哈尔滨工程大学医院，黑龙江 哈尔滨 15O0o1； 3．大庆龙南医院，黑龙江大庆 163453；4．黑龙江省建工医院，黑龙江 哈尔滨 15004o) 摘 要：目的：探讨项针疗法对大鼠脑缺血再灌注模型Hm(缺氧诱导因子)一1a及 H珏’一1amRNA表达 的影响。方法：随机将 72只大鼠分为3组：假手术组(A)、造模组 (B)、电项针组(C)，每组各24只，各组 再分为 12h、24h、3d、5d等4个时间点，每个时间点6只。采用线栓法制备脑缺血再灌注动物模型，观 察项针疗法对脑缺血再灌注大鼠HⅡ一la及 HⅡ一lamRNA表达的影响。结果：再灌注第3d，B组梗死 灶周围神经细胞数 目减少、肿胀更加明显，胞浆淡染，胞核溶解，结构不清，细胞间质呈空泡样改变，残 留血管充血，梗死灶周围胶质细胞明显增多；C组梗死灶周围神经细胞肿胀减轻，核仁清楚，结构不清， 可见少量固缩神经元，较模型组损伤程度减轻。再灌注 l2h，缺血中心区及缺血周边区络膜、血管内皮 细胞、神经元可见H匝F一1a阳性表达。c组大鼠神经元细胞腼 一1a表达明显增加，第3d达高峰，第5 d逐渐下降，与B组比较，有显著性差异(PO．01)。结论：项针疗法能够改善缺血半影区神经细胞功能 状态，促进神经胶质细胞的增生；表明项针疗法能够通过促进H 一1Q及岍 一1mRNA的表达，提高脑 神经细胞对缺氧的耐受，从而发挥脑保护作用。 关键词：脑缺血再灌注；大鼠；项针；腼 ’一la；肼 ’一lamRNA 中图分类号：R246．1 ． 文献标识码 ：A 文章编号：1005一cr779(2009)o3—0033—02 项针疗法是高维滨教授在总结多年来临床经验的 原位杂交DIG染色系统购 自天津市灏洋生物制品科技 基础上提出的一种新的治疗脑病的有效方法，在临床 有限责任公司。 实践中已取得十分卓越的效果。缺氧诱导因子 一1 1．2 方法 (hyp蕊a—inducible 一k，mF—k)是低氧应答过 1．2．1 实验动物与分组 随机将72只大鼠分为 3 程中起重要作用的转录因子，其诱导的基因表达可改 组：假手术组(A)、造模组(B)、电项针组(C)，每组各24 善脑梗死后缺血半暗带血循环和葡萄糖的运输，介导 只，各组再分为 l2h、24h、3d、5d等4个时间点，每个 缺氧后的低氧耐受，对缺血、缺氧神经元具有重要的保 时间点 6只。 护作用。本研究旨在通过观察项针疗法对大鼠脑缺血 1．2．2 模型制备 采用改 良的zealoI粹…法建立大 再灌注模型腼 一la及腼 ’一lamRNA表达的影响，探 鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。选用直径为0．20～ 讨该疗法治疗急性脑梗死的作用机制，为临床实践提 0．25nⅡn的强力钓鱼线，剪成长为4o 50砌· 的栓线， 供理论依据。 线前端经酒精灯理形成光滑球形，在手术显微镜下观 1 材料与方法 ‘ 察其光滑程度，不合格的剔除，合格栓线消毒后放人 1．1材料 健康雄性 Wister大鼠72只，体重 250～ l25rI dl肝素生理盐水中备用。大鼠术前禁食 l2h， 320g，由黑龙江中医药大学动物实验中心提供。鼠抗 10％水和氯醛(0．35nd／l00g)腹腔注射麻醉大鼠。颈 }Ⅲ一la免疫组化试剂盒、抗体稀释度 1：80、DAB显色 部正中切 口，沿双侧颌下腺中间剪开浅筋膜，钝性分离 试剂盒均购 自武汉博士德公司。mF一1a(mRNA) H