实验二十一运动对机体器官组织影响的实验研究.docVIP

实验二十一 运动对机体器官组织影响的实验研究 [实验内容] 设计实验方案，研究运动对机体器官组织的影响。 [实验目的] （一）使学生了解设计性实验的过程，了解动物运动负荷模型的建立。 （二）使学生学会对实验结果进行分析讨论，培养学生综合分析问题、解决问题的能力和团结协作的精神。 [材料与器具] 根据实验要求和实验室条件自行选择。 [方法与步骤] (一)把学生分成若干个组，4-6人为一组，要求各组自行设计一个运动模型。 （二）小组讨论，确定实验所要研究的器官组织。 （三）根据拟定的实验内容和目标，学生查阅文献，设计实验方案。 （四）确定实验对象、实验方法与步骤。 （五）明确分工，按照实验方案进行正式实验。 （六）对实验结果进行讨论，以小论文的形式写实验报告。 [实验设计方案及结果分析示例] 案例一 （一）实验内容 运动对消化系统器官的影响。 （二）实验目的 通过建立运动负荷模型，观察运动对消化系统各器官形态结构的影响。 （三）实验对象 SD大鼠18只。 （四）实验器材 大鼠大鼠动物运动跑台电子天平电子称ASP300组织处理机LEICA），EG1160包埋机LEICA），RM2145切片机LEICA），HI1210展片机LEICA），HI1220烤片机LEICA），SP9000磨刀机LEICA），水浴锅，奥林巴斯光学显微镜OLYMPUS），载玻片盖玻片中性树胶甲醛无水乙醇多聚甲醛氯化钠苏木精曙红Y二甲苯盐酸乌拉坦采用健康雄性SD大鼠。实验动物由实验动物中心提供，饲料采用国家标准啮齿类动物干燥饲料。实验大鼠为3月龄，其平均体重为250g左右，共只。常规分笼饲养，自由饮水进食，常规光照，动物室温度为18℃23℃，湿度40～60％。实验大鼠适应喂养后开始训练，采用递增强度的方式进行跑台运动，运动负荷参考Bedford的研究进行。具体训练方案如下： 对照组：正常笼内生活状态，自由饮食，不运动。 ：每5天，共8。适应性训练3后开始增加运动时间和运动速度：第，训练10min，速度10m/min，第训练15min，速度10m/min，第训练时间为15min，速度13m/min，如此，运动时间、速度隔日交替增加：先增时间, 递增时间5min, 递增速度3m/min。运动速度增至20m/min，运动持续时间增至60min后持续该强度和运动量。 ：每 6 天，共8 。适应性训练3后开始增加运动时间和运动速度：第 速度10m/min, 时间10min 第速度10m/min, 时间15min，第速度13m/min, 时间15min。当运动速度增至20m/min，增加跑台坡度为5度，最终运动速度增至35 m/min，运动持续时间增至60min整个训练过程用电刺激来强迫大鼠进行跑台训练电刺激1mA具体方如下：1.0×1.0×0.2厘米4℃冰箱保存。固定以后，在自来水下流水冲洗10分钟。 (2) 脱水与透明：脱水时常用70%、80%、90%、95%、100%各级酒精。每级10-30分钟。透明常用二甲苯。每次20-30分钟，进行2次。 (3) 浸蜡与包埋：将透明好的组织块放入石蜡，中间换二次石蜡，每次20-30分钟，温度调至略高于石蜡熔点的温度。将熔化的石蜡倒入包埋器中， 用热镊子把材料迅速移入包埋器中，并摆好位置，切记观察面向下摆放，并将包埋器移入水面，缓慢浸入水中。等石蜡完全凝结以后，从水中取出，并注明包埋块的名称、组别和日期等。 (4) 切片、展片与贴片：将材料连同周围的石蜡用解剖刀修切成梯形，四周离组织1-2毫米，前端离材料宜近100 %—95 %—90 %—80 %—70 %各级酒精后入蒸馏水。 (6) 染色：用H.E染色法，操作步骤如下：入苏木精染液10分钟，至核为紫红色，再用自来水流水洗至核为鲜亮的蓝色。若过染，可用盐酸酒精分色。之后入伊红染液30秒至1分钟，再快速经80 %-90%酒精分色，然后用95%的酒精分色，时间酌定。伊红主要染细胞质，着色呈桃红色。入纯酒精中3分钟。 (7) 透明与封片：入二甲苯中3分钟至透明。滴加一小滴加拿大树脂并用盖玻片小心封片，自然风干。 (8) 观察与拍照： 切片制作完成后可直接在光学显微镜下观察各器官的组织结构并拍照。 （六）实验结果（以实验后实际结果而定） （七）分析与讨论（以实验后实际结果而定） （八）结论（以实验后实际结果而定） 案例二 （一）实验内容 运动对大鼠运动系统各器官Ca 2+-ATP酶的影响。 （二）实验目的 通过建立运动负荷模型，观察运动对运动系统各器官形态结构的影响。 （三）实验对象 SD大鼠18只。 （四）实验器材 SD大鼠大鼠大鼠动物运动跑台电子天平电子称奥林巴斯光学显微镜OLYMPUS），载玻片盖玻片中性树胶无水乙醇二甲苯乌拉坦生理盐水冲洗淤血，组织化学采用，严格按试剂盒说明书