邻二氮菲分光光度法测定微量铁.pptVIP

紫外-可见分光光度计 ． 分光光度计的主要部件和工作原理： * * 邻二氮菲分光光度法测定微量铁 实验目的: 了解可见分光光度法测定微量铁的方法和原理。 熟悉722型 分光光度计的使用方法。 熟悉平行测定原则的应用。 根据 Lamber-Beer 定律：A=εbc，当入射光波长λ及液层厚度b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。 实验原理 A= - lgT = Kbc A 标准曲线(A - C曲线) Cx C Ax 1、标准曲线法 2、直接比较法 ⑴样品溶液cx和标准溶液cs在相同条件下显色。 ⑵在波长λmax下，测定吸光度As、Ax。 ⑶要求A-C线性良好,样品溶液与标准溶液浓度相 近，以减小测定误差。 ⑷ 根据Lamber-Beer定律计算样品溶液的浓度： 在 pH=2～9 的溶液中，Fe2+ 与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物 Fe(phen)32+： 桔红色 无色 显色反应: 配合物: lgK稳 = 21.3 ε508 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1 因Fe3+ 能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色， lgK稳=14.1。加入显色剂之前，应用盐酸羟胺 (NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+: 2Fe 3+ + 2NH2OH → 2Fe 2+ + N2 + H2O + 2H+  测定时控制溶液的酸度为 pH≈5。用邻二氮菲可测定 试样中铁的含量。 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 (1)标准曲线的制作: 在6支50 mL容量瓶中，①分别加入0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50 mL 1.0×10-3 mol·L-1 铁标准溶液， ②加入 1.00 mL 100g·L-1 盐酸羟胺溶液，③2.00 mL 1.5g·L-1邻二氮菲溶液, ④5.00 mL NaAc溶液，以去离子水稀释至刻度，摇匀。立即测定其吸光度。 (2)试样测定: 准确吸取2.0 mL，按(1)的操作步骤，要求试样与标准溶液的显色应遵守平行测定的原则。 实验步骤 1. 开机预热30分钟。 2.选 λmax = 508 nm 3. 将参比溶液（最前面）、标准溶液等依次放入比色皿。 4. 打开暗箱盖，调节 T = 0；盖上暗箱盖，用参比溶液调节 A = 0。 5. 测定标准溶液和待测溶液的A值。 仪器的基本操作 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸 收曲线，选择测量的最适宜波长条件。 2. 以铁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标 准曲线。根据试样的吸光度，从标准曲线求出 自来水中铁的含量以 mmol·L-1 表示。 数据处理 1.附标准曲线 2.样品铁的含量测定 ⑴标准曲线法 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 Ax=0.335 样品中Fe3+浓度： 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 A (2)比较法 所选取标准溶液的吸光度：As应与Ax的值最接近。 待测溶液的吸光度： Ax 样品中Fe3+浓度： 1. 邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为何要加入盐酸 羟胺溶液？ 2. 吸收曲线与标准曲线有何区别？在实际应用中有何意义？ 3. 透射比与吸光度两者关系如何？测定条件指哪些？ 4. 邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有哪些？ 5. 加各种试剂的顺序能否颠倒？ 注意事项和问题