重组pEGFP--N1--CD146表达载体的构建及其对MDA--MB--231细胞侵袭、凋亡的影响.pdfVIP

重组pEGFP-N1一CDl 侵袭、凋亡的影响 中文摘要 目的：构建人类CDl46基因的表达载体，研究其对乳腺癌细胞MDA- 船一231细胞侵袭、凋亡的影响。 方法：采用分子生物学方法构建人类CDl46基因的表达载体，利用脂质 体Lipofectamine 下评价转染效果，利用RT—PCR、Westernblot分别检测基因CDl46 在mRNA、蛋白水平上的表达效果。采用MTT法检测细胞在体外增殖的 能力；流式细胞仪法FCM检测细胞的周期分布及凋亡水平的变化情况； Transwel l实验观察细胞侵袭能力改变。 Western mRNA blot结果显示，与对照组相比，转染细胞后，实验组CDl46 和蛋白的水平表达均有增高(尺O．05)；增殖实验结果显示转染后实验 组细胞增值能力较对照组细胞增高(PO．05)；流式结果表明，与对照 验组细胞侵袭能力较对照组细胞明显增强(PO．05)。 时抑制细胞凋亡的发生，并促进细胞体外侵袭能力。 关键词：CDl46；MDA-MB-231细胞；侵袭：凋亡 ㈣Y…2㈣D洲8洲7I 川5㈣5㈣5 CD 146 can humanbreastcancercellMDA·-MB．．231 genepromote andinvasion proliferation Abstract To AIM theinhibitioneffectsofCD146 onthe andinvasion investigate gene proliferation human of breastC．iLrlCercellMB．MDA231． Methods series toa ofmolecular CD146 methods，the According biology overexpression was constructed．ThevectorwastransfectedintoMB-MDA231 cells plasmid by the ofCD146mRNAand were lipofectamine，andexpression protein analyzed by RT-PCRandWesternblot MTT wereusedto analysis observe respectively．Thenassays the effectofCD146oncell in FCMwereusedtodetect inhibitory proliferationvitro，and thecell and effectoncellinvasi