生化分离技术第十一章典型产品的分离工艺.pptVIP

第一节?青霉素的分离工艺 d.青霉素与醋酸钾的配比 根据前面的反应式知道，1摩尔醋酸钾可以生成1摩尔青霉素钾盐。但由于反应是可逆的，故采取过量0.1摩尔醋酸钾，使反应利于向青霉素钾盐的方向进行，另外，丁酯萃取液中杂酸的存在，要消耗一部分醋酸钾。因此，结晶过程中要根据污染数多少而决定醋酸钾的加入量，以保证反应能完全进行。如污染数在0.5%左右，则反应时加入醋酸钾摩尔比为1：1.6。 第一节?青霉素的分离工艺 ③青霉素水溶液—丁醇减压共沸生产钠盐的结晶控制 二次丁酯萃取液以0.5mol/LNaOH溶液萃取，在pH6.4～6.8下得到钠盐水浓缩液，浓度为15～25万u/ml，加2.5～3倍体积的丁醇，在16～26℃，0.67～1.3 kPa下共沸蒸馏。一般开始共沸结晶时，先加水液相同体积的丁醇作为基础料，其它1.5～2倍丁醇随蒸馏过程分5～6次补加入罐内。蒸馏时水分与丁醇成共沸物蒸出，当浓缩到原来水浓缩液体积，气相中含水量达到2%～4%时停止蒸馏，钠盐则结晶析出。在钠盐结晶析出过程中要注意养晶，以利于晶体粗大利于过滤，且纯净度高杂质少。生产上养晶一般补加第三次丁醇后，亦即蒸馏三个小时后，此时料液变粘，有泡沫产生，同时溶液温度有所下降，此即达到过饱和状态，是即将出现晶体析出的象征，这个时候要采取措施减缓其蒸发速度，使过饱和度逐渐形成，使晶核慢慢产生，以利晶体成长，待大量晶核出现30～60分钟后，再加大蒸发速度和脱水，使结晶完全。结晶后的钠盐经过滤，洗涤后干燥得工业品钠盐。 第二节 维生素C的分离工艺 维生素C（Vitamin C，VC）又名抗坏血酸，化学名称为L-2,3,5,6-四羟基-2-己烯酸-γ-内酯。是一种白色或略带淡黄色的结晶或粉末，无臭、味酸、遇光色泽渐变深，水溶液显酸性。结晶体在干燥空气中较稳定，但其水溶液能被空气中氧和其它氧化剂所破坏，所以贮藏时要阴凉干燥，密闭避光。熔点为190～1920C，熔融时同时分解。 维生素C易溶于水，略溶于乙醇，不溶于乙醚、氯仿和石油醚等有机溶剂。水溶液在pH为5～6之间稳定，若pH值过高或过低，并在空气，光线和温度的影响下，可促使内酯环水解，并可进一步发生脱羧反应而成糠醛，聚合易变色。 第二节 维生素C的分离工艺 目前维生素C的生产主要采用两步发酵法。即以葡萄糖为原料，经高压催化氢化制备山梨醇，然后以山梨醇为原料经两步微生物（黑醋菌、假单孢杆菌和氧化葡萄糖酸杆菌的混合菌株）发酵制备2-酮基-L-古龙酸，再将此酸酸（或碱）转化等工序制得粗品维生素C，粗品维生素C经精制得成品Vc。下面重点介绍2-酮基-L-古龙酸的分离工艺过程。 第二节 维生素C的分离工艺 一、2-酮基-L-古龙酸的分离原理 山梨醇经两步微生物发酵主要生成2-酮基-L-古龙酸，使发酵液酸度提高，为了保证产酸正常进行，必须定期滴加灭菌的碳酸钠溶液调pH值，使pH值保持7.0左右，这样发酵终点所得溶液是含古龙酸钠及少量古龙酸的发酵液。在发酵终点时，用于发酵的芽孢杆菌菌体已逐步自溶成碎片，使大量的菌体蛋白溶入发酵液中。因此，发酵液中除了含有一定量的2-酮基-L-古龙酸钠及2-酮基-L-古龙酸外，还含有大量的菌体蛋白。要将2-酮基-L-古龙酸钠从发酵液中分离提取出来，必须先除去菌体蛋白。除去菌体蛋白，可将发酵液用盐酸酸化调至菌体蛋白等电点，使菌体蛋白沉淀，静置数小时后去掉菌体蛋白。除去菌体蛋白的发酵液中含2-酮基-L-古龙酸钠及2-酮基-L-古龙酸，由于2-酮基-L-古龙酸钠（能解离为阴、阳离子），用732阳离子交换树脂进行交换可去掉其中Na+而得2-酮基-L-古龙酸稀液。高温下2-酮基-L-古龙酸不稳定，所以为了浓缩古龙酸溶液使其达到一定浓度，可采用减压浓缩的方法。由于 低温下2-酮基-L-古龙酸溶解度较小，所以可经冷却结晶得2-酮基-L-古龙酸晶体，从而实现了从发酵液中提取分离2-酮基-L-古龙酸的操作过程。 第二节 维生素C的分离工艺 二、2-酮基-L-古龙酸的分离工艺 1．工艺过程 2-酮基-L-古龙酸的分离工艺过程如下图所示： （1）离子交换 ①将发酵液冷却后用盐酸酸化，调至菌体蛋白等电点，使菌体蛋白沉淀。静置数小时后去掉菌体蛋白，将酸化上清液以(2～3)m3/h的流速压入一次阳离子交换柱进行离子交换。当回流到pH3.5时，开始收集交换液，控制流出液的pH值，以防树脂饱和，发酵液交换完后，用纯水洗柱，至流出液古龙酸含量低于1mg/ml以下为止。当流出液达到一定pH值时，则更换树脂进行交换，原树脂进行再生处理。 第二节 维生素C的分离工艺 ② 将经过一次交换后的流出液和洗液合并，在加热罐内调pH至