胞HCT116L-OHP的建立及其耐药机制初探.pdfVIP

肿瘤 2011 年 8 月第 31 卷第 8 期　Tumor Vol.31, August 2011　　 675 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2011.08.001 Copyright© 2011 by TUM OR 基础研究 Basic Research · 人结肠癌奥沙利铂耐药细胞HCT 116/L-OHP的建立及其耐药机制初探 陆　海 孙　珏 许建华 范忠泽 ， ， ， 上海中医药大学附属普陀医院肿瘤科 上海　200062 ， [ 摘要 ]　目的：建立人结肠癌奥沙利铂 （oxaliplatin，L-OHP ）耐药细胞 HCT116/L-OHP，并初步探讨其可能的耐 药机制。方法：通过逐步增加作用于亲代细胞 HCT116 的 L-OHP 浓度与间断大剂量 L-OHP 作用，建立耐药细胞 HCT116/L-OHP ；MTT 法检测 L-OHP、5- 氟尿嘧啶 （5-fluorouracil ，5-FU ）、顺铂 （cisplatin ）和 7- 乙基 -10- 羟 基喜树碱 （7-ethyl-10-hydrol-camptothecin，HCPT ）对 HCT116 和 HCT116/L-OHP 细胞 的细胞毒性；蛋 白质 印 迹法检测相关耐药蛋白的表达；基因芯片检测信号通路的改变。结果：成功构建了稳定耐药的耐药细胞 HCT116/ L-OHP，耐药倍数为17 倍，与5-FU 、DDP 和HCPT 有不同程度的交叉耐药性。与HCT116 细胞比较，HCT116/L-OHP 细胞中P 糖蛋白 （P-glycoprotein，P-gp ）、肺耐药蛋白 （lung resistance protein，LRP) 和谷胱甘肽 S 转移酶 （glutathione P P S-transferase，GST ）的表达上调 （ ＜ 0.01），9 条信号通路上调 （ ＜ 0.05 ），其中细胞周期信号通路上调最明显， p53 信号通路次之。结论：HCT116/L-OHP 细胞具有稳定的耐药性，其耐药机制可能与细胞耐药蛋白表达、细胞周 期和 p53 信号通路表达上调有关。 [ 关键词 ]　结直肠肿瘤 抗药性 多药 奥沙利铂 细胞 HCT 116 ； ， ； ； ， [中图分类号]　R735.3 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2011) 08-0675-07 Establishment of an oxaliplatin-resistant human colon carcinoma HCT116/L-OHP cell and preliminary exploration for the mechanism of resistance LU Hai, SUN Jue, XU Jian-hua, FAN Zhong-ze Department of Oncology, Putuo Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 200062, China [A BST RA CT ]　 Obj ectiv e : To establish an oxaliplatin (L-OHP)-resistant human colon carcinoma HCT116/L-OHP cell, and to preliminarily explore the mechanism of resistance. Methods: Oxaliplatin- resistant HCT116/L-OHP cells were established by gradually increasing the concen