电针对创伤应激大鼠外周和中枢TLR24以及炎性细胞因子表达的调节作用与机制研究.pdf

电针对创伤应激大鼠外周和中枢TLR2／4以及炎性 细胞因子表达的调节作用与机制 院 系： 上海医学院 专 业： 中西医结合基础 姓 名： 汪军 指导教师： 吴根诚教授 导师小组： 王彦青副教授 肇晖副教授 曹小定教授 完成日期： 2009年10月18日 复旦大学博士研究生论文 目 录 英文缩写词表………………………………………………………………………………………3 中文摘要……………………………………………………………………………………………4 Abs打act…………………………………………………………………………………………………………………………．14 前 言…………………………………………………………………………………………．25 材料与方法………………………………………………………………………………………．29 1．材料……………………………………………………………………………………………．29 1．1实验动物…………………………………………………………………………29 1．2主要药品及试剂…………………………………………………………………29 1．3主要仪器…………………………………………………………………………30 2．方j陵……………………………………………………………………………………………………………．．3l 2．1创伤应激大鼠模型制备…………………………………………………………3l 2．2电针穴位和方法…………………………………………………………………32 2．3给药方法…………………………………………………………………………32 2．4双侧肾上腺切除术………………………………………………………………32 2．5实时荧光定量PCR………………………………………………………………．32 2．6Western Blot方法………………………………………………………………34 2．7酶联免疫吸附法(ELISA)……………………………………………………．36 2．8荧光组织化学……………………………………………………………………37 2．9中枢小胶质细胞分离……………………………………………………………38 2．10流式细胞术检测细胞表面抗原………………………………………………．39 2．11小胶质细胞的原代培养及细胞化学鉴定……………………………………．39 2．12淋巴细胞转化功能的检测……………………………………………………．40 2．13外周血中去甲肾上腺素含量测定……………………………………………一40 2．14有关溶液配制…………………………………………………………………．40 2．15统计…………………………………………………………………………………．46 实验结果…………………………………………………………………………………………．47 一、电针对创伤应激大鼠外周TLR2／4表达和炎性细胞因子表达的影响………………47 1．1创伤应激后外周TLR2／4表达及炎性细胞因子表达的时程变化……………．．47 1．2电针抑制创伤应激大鼠脾脏TLR2／4表达……………………………………一47 1．3电针抑制脾脏和循环血中炎性细胞因子表达…………………………………48 1．4职A轴及交感神经系统在电针调节创伤应激大鼠外周TLR及炎性细胞因子表达 中的作用………………………………………………………………………………．5l 二、电针对创伤应激大鼠中枢TLR2／4表达和炎性细胞因子表达的影响………………56 2．1创伤