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■■I■r 目 录
1 低浓度依托泊苷通过Rb.Mdm2信号途径诱导A549细胞衰老
00000
的研究……………………………………0000……………1
1.1 中文摘要……………………………...………………………1
1.2 英文摘要………………………………………………………4
000000
1.3 前言…···…………eooeooooe………………0 00……······…7
1.4 材料与方法……………………………………………………13
1.5 结果…···……······························…“·O0000”一”21
1.6 讨论···············································一·””””””一””·32
o o o eo
1.7 结论……………eoe e oe o………………………………““”40
1.8 参考文献………………………………………………………4l
1.9 英汉缩略词对照表……………………………………………47
2 致谢…···……·············································””””””48
3 细胞衰老与肿瘤治疗的研究进展(综述)…………………49
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目的:本实验利用依托泊苷(vP.16)作用于体外培养的人肺腺
癌A549细胞,探讨低浓度的VP.16是否能诱导A549细胞衰老;通
过检测磷酸化Rb蛋白、Mdm2蛋白的表达水平和细胞周期分布,探
讨Mdm2.Rb信号通路在细胞衰老中的作用,以深入低剂量节律
(LDM)化疗机制的研究。方法:将A549细胞分为4组:对照组(单
laMVP.16的培养
细胞悬液+培养基)、实验1组(单细胞悬液+含1
11
基)、实验2组(单细胞悬液+含5MVP.16的培养基)、实验3组(单
II
细胞悬液+含25
MVP.16的培养基)。各组细胞培养48小时后分别
的影响;细胞化学方法检测衰老相关.B.半乳糖苷酶的活性;流式细
胞术检测VP.16对人肺腺癌A549细胞周期分布的影响;免疫细胞化
学方法检测磷酸化Rb蛋白和Mdm2蛋白的表达。结果:①不同浓度的
VP.16(0uM、1IlM、5pM、25|l
M)作用于A549细胞48小时后,
对照组细胞生长旺盛,呈丛簇状排列,细胞呈长梭形或多边形,细胞
形态饱满,胞质丰富,胞核居于细胞中央:实验1组细胞生长受到轻
微抑制,与对照组相比细胞形态无明显改变;实验2组细胞多散在或
呈小堆排列,细胞皱缩呈圆形、卵圆形或多角形,或升出伪足,胞质
减少;实验3组细胞生长受到明显的抑制,部分细胞变圆、浮起,活
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