一氧化氮对肿瘤的作用.docVIP

成绩： 山东大学医学院 机能学实验设计 题 目：一氧化氮对肿瘤的作用 设计者：李彩燕 胡月 李晓莹 曲强 专 业：06级临床七年制 班 级：3班 联系电话 2009年6月2日 立题依据（主要说明本研究的目的、意义、国内外研究现状及主要参考文献） 研究现状 肿瘤是一种常见病、多发病，其中恶性肿瘤是目前危害人类健康最严重的疾病之一。抗肿瘤药一直是科学家们研究的热点。 生物治疗被称为治疗肿瘤的第四种治疗手段。生物治疗研究范围非常广泛, 主要包括基因治疗、免疫治疗 (过继免疫治疗、疫苗治疗、分子抗体治疗、细胞因子治疗等 )、抗血管生成治疗、干细胞治疗、诱导分化及凋亡、内分泌治疗等, 其中分子靶向治疗是近年来生物治疗发展较快的治疗方法。 分子靶向药物是在分子生物学、分子遗传学理论基础上出现的新药, 相对于传统化疗药物有很多优势, 形成了一门治疗肿瘤的新领域，为肿瘤的治疗提供了一种副作用较小的方法。近20年来，人类对肿瘤细胞生物学和遗传学的认识有了较大的发展, 对癌基因、抑癌基因、细胞凋亡、肿瘤血管形成等的研究也由细胞生物学水平转变到分子生物学水平, 许多新的概念包括信号传导、细胞周期、DNA修复等已经得到临床验证。因此, 大量以肿瘤细胞水平表达为靶点的新的抗肿瘤药物不断问世，并逐渐走向临床, 主要包括细胞信号转导分子抑制剂、新生血管抑制剂、靶向端粒酶抑制剂以及针对肿瘤耐药的逆转剂。 NO 是近年来发现的生物体内重要的生物活性小分子,其参与体内细胞间信息传递和许多生理、病理过程,尤其是NO 与肿瘤生长、转移、细胞凋亡及肿瘤杀伤、肿瘤治疗等方面的关系倍受关注,成为近年来NO 研究的热点。 近来研究发现，肿瘤组织中NO 对肿瘤细胞的作用是双向性的,并且有NO 剂量依赖性。高浓度的NO(nmol 水平) 具有细胞毒性作用,可抑制肿瘤生长,杀伤肿瘤细胞,但适宜持续的较低浓度的NO (fmol 或pmol水平) 可增加肿瘤组织血供,促进肿瘤生长、新生血管形成。　 1）NO与肿瘤细胞凋亡 NO及其在细胞内产生的过氧亚硝酸根ONOO- 均为性质活泼的化学物质, 可造成DNA 的损伤和突变,此可引起P53 抑癌基因的激活应答,介导损伤DNA 的修复或细胞凋亡。在研究中曾发现NO 介导了巨噬细胞对P815 肿瘤细胞的杀伤作用并且表现为肿瘤细胞的凋亡,其作用可被NOS 抑制剂L - NAME 抑制。有研究表明:NO 可诱导肿瘤细胞的凋亡,且呈剂量、时间依赖性,NO引起细胞凋亡时有P53 基因mRNA 和P53 蛋白合成的增加,NO诱导肿瘤细胞凋亡与P53 蓄积有关,抑癌基因P53 介导了NO引起的肿瘤细胞凋亡。 2）NO与肿瘤生长及肿瘤血管形成 通常肿瘤细胞产生适度较低量的NO促进肿瘤组织血管形成。血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor , VEGF )是重要的血管形因子, 肿瘤患者血清中VEGF 多有升高, 手术切除瘤体后降至正常, 实体瘤中也有升高VEGF 表达。VEGF 与内皮细胞表面的相应受体结合,通过细胞内钙调蛋白和磷酸肌醇信号传导途径增强细胞内NOS 的表达,使NO成增多,若用Ca2 + 螯合剂和钙调蛋白拮抗剂BAPTA 或Calmidazolium 以及蛋白酪氨酸激酶抑制剂三羟异黄酮可阻断VEGF 增加NO生成。NO可激活血管内皮细胞中的鸟苷酸环化酶,使细胞内cGMP 浓度升高,通过cGMP 信号传导通路在VEGF 调节血管形成的过程中发挥作用,可使微血管扩张,内皮细胞移动、增生,促进新血管形成,用NOS 抑制剂L -NAME 可阻断VEGF 促血管形成的作用。 另有少数研究报告NO 可抑制血管形成。Pipili Synetos认为NO是内源性血管形成抑制剂。有报道NO可抑制VEGF增强子活性,从而抑制VEGF 基因表达。NO对血管形成的双重作用依赖于NO浓度、细胞内微环境及细胞类型。NO抑制肿瘤血管形成的作用可能是由于NO的毒性作用直接抑制内皮细胞增殖或诱导其凋亡,也可能通过调节或介导其他血管形成相关因子来抑制血管形成。 目的与意义 本实验通过体外给予肿瘤小鼠模型不同浓度的NO供体亚硝基乙酰青霉胺（SNAP），使其在体内代谢生成NO,进而探讨NO对肿瘤细胞凋亡的作用和验证NO对肿瘤血管（抑制或促进血管生成）的作用，从而验证其对肿瘤的综合作用，为临床给药提供参考。 【参考文献】 1. 王小华，张平，李国亮，张忠山，王铲 TNP一470联合CTX对小鼠LA795 肺腺癌皮下移植瘤生长的影响 湘南学院学报(医学版)2008年12月第10卷第4