第二章蛋白质样品的制备3.2.pptVIP

第二章 蛋白质样品的制备 蛋白质样品的制备是蛋白质组研究的第一步，无论后续采用怎样的分离或鉴定手段，样品制备都是关键步骤。从蛋白质组大规模研究的角度而言，要求样品制备尽可能获得所有的蛋白质，但是由于蛋白质种类多、丰度不一和物化特性多样等，要达到真正的全息制备是具有难度的。 样品制备的原则 尽可能采用简单方法进行样品处理，以避免蛋白丢失。 细胞和组织样品的制备应尽可能减少蛋白的降解，低温和蛋白酶抑制剂以防止蛋白的降解。 样品裂解液应该新鲜配置，并且分装冻存于-80 ℃。勿反复冻融已制备好的样品。 通过超速离心清除所有的杂质。 加入尿素后加温不要超过37 ℃，防止氨甲酰化而修饰蛋白。 一、样品的类型 1.整体样品 是生物个体小的物种（如微生物），可以整体 取样。 2.组织样品 有一个采样的过程，就是从整体部分或整批器官 中抽取一定量具有代表性的样品进行实验。 3.细胞样品 包括固体基质中培养的细胞、体外悬浮培养生长 的细胞、周期性细胞样品（如红细胞、淋巴细 胞）和从组织中分离同类的细胞样品。 4.可溶性样品 是可溶性液体样品，如