液相色谱常见问题及其对策61741.pptVIP

液相色谱常见问题及其对策 液相色谱常见问题类型 A. 压力异常（偏高、波动） B. 漏液 C. 保留时间漂移 D. 基线问题（漂移、噪声） E. 峰形异常 一、 压力异常 现象：无压力，流动相不流动 可能原因 1、保险丝断或电源问题 2、柱塞杆折断 3、泵头内有空气或流动相不足 4、单向阀损坏 5、漏液 6、压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力) 一、压力异常 现象：压力持续偏高或不断上升 1、流速设定过高 2、保护柱或柱子筛板堵塞 3、流动相使用不当或有缓冲盐出 4、色谱柱选择不当 5、进样阀损坏 一、压力异常 现象：压力持续偏低 1、流速设定过低 2、色谱柱选择不当 3、柱温过高 4、系统漏液 一、压力异常 现象：压力波动 可能原因 1、泵头中有气泡 2、单向阀损坏 3、柱塞密封圈损坏 4、脱气不充分 5、系统漏液 6、使用了梯度洗脱 二、漏液 接头处漏液 1、接头处松动 2、接头磨损 3、接头被污染 二、漏液 泵漏液 1、单向阀松动 2、泵密封损坏 3、接头松动（不要拧的太紧） 二、漏液 进样阀漏液 可能原因 1、转子密封损坏 2、定量环堵塞 3、进样口密封松动 4、进样针尺寸不合适 5、废液管产生虹吸 6、废液管堵塞 二、漏液 检测器漏液 可能原因 1、流通池垫片损坏 2、流通池透镜破碎 3、手紧接头处漏液 4、废液管堵塞 5、流通池堵塞 三、保留时间漂移 保留时间漂移 可能原因 1、柱温变化 2、流动相组分变化 3、色谱柱没有平衡 4、流速变化 5、泵中有气泡 6、流动相选择不当 7、缓冲容量不够 四、基线问题 基线漂移 可能原因 1、温度波动 2、流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂) 3、流通池被污染或有气泡 4、流动相配比不当或流速变化 5、柱子平衡（约30－60min） 6、流动相污染，变质或由低品质溶剂配成 7、样品中有强保留的物质以馒头样峰被洗出 8、检测器没有设定在最大吸收波长处 四、基线问题 基线噪声（规则的） 可能原因 1、流动相、泵、检测器中有气泡 2、有地方漏液 3、流动相混和不均匀 4、温度影响（检测器和柱温差别太大） 5、其他电子设备的影响 四、基线问题 基线噪声（不规则的） 可能原因 1、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 2、有地方漏液 3、流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 4、检测池能量不足 5、系统内有气泡 五、峰形异常 前沿峰、拖尾峰 可能原因 1、柱塞板堵塞 2、色谱柱塌陷 3、干扰峰 4、柱温过低 5、缓冲不足或不合适 6、重金属污染 7、样品溶剂选择不当 8、样品过载 五、峰形异常 分叉峰 可能原因 1、保护柱或分析柱污染 2、样品溶剂不溶于流动相 五、峰形异常 峰展宽 1. 进样体积过大 2. 流动相粘度过高 3. 检测池体积过大 4. 保留时间过长 5. 样品过载 五、峰形异常 鬼峰 1、进样阀残余峰 2、柱未平衡 3、水污染 4、柱未平衡 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱) 液相色谱容易出问题的部件 维护流程图 吸滤头 单向阀 柱塞密封圈 线路过滤器 手动进样器 检测器 液相色谱容易出问题的部件 吸滤头 材料：不锈钢烧结，孔径10um 故障：堵塞 表现：管路中不断有气泡生成 措施：用5％～20％的稀硝酸，超声波清洗， 再用蒸馏水清洗 注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断 液相色谱容易出问题的部件 单向阀 故障1：宝石球粘附于垫片 表现：泵无法吸液或排液，流路不通 措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生压， 使宝石球与垫片分开 2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中， 用超声波清洗 故障2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好 表现：系统压力波动大 措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超 声波清洗 液相色谱容易出问题的部件 故障：密封圈磨损而导致 密封不良 现象：系统压力波动大或漏液 措施：更换密封圈 注意点： 更换密封圈 拆卸泵头前，柱塞杆复位 液相色谱容易出问题的部件 手动进样阀 故障：转子密封损坏 现象：漏液 原因：a 拧的太紧 b 样品太脏 c 针头损坏或不使用液相专用针 解决措施：更换转子密封，并在使用时注意保养 液相色谱容易出问题的部件 手动进样阀 故障：载样困难 原因：a 定量环堵塞 b 进样器污染 解决措施：清洗或更换定量环、进样器 液相色谱容易出问题的部件 柱子 故障：系统高压、峰型变差（拖尾峰、前沿峰、 分叉峰），保留时间的改变 解决措施：清洗 正相柱，正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇 反相柱，甲醇、乙腈、氯仿、异丙醇、0.05M稀 硫酸 液相色谱容易出问题的部件 峰产生有肩或分叉的原因 1. 柱子劣化 （进口处产生不均匀的空隙） 2. 样品劣化 （生成氧化物、分解物等） 判断标准 所有的峰都产