异氟醚对大鼠脑缺血-再灌注诱导c-Jun磷酸化的影响.DOCVIP

临床医学论文-异氟醚对大鼠脑缺血/再灌注诱导c-Jun磷酸化的影响 ???????????????????????作者：温相如，关秋华，苗蓓，张光毅 【摘要】? 目的 观察大鼠脑缺血/再灌注后c-Jun蛋白磷酸化情况以及异氟醚对其的影响。方法 四动脉结扎法建立大鼠脑缺血模型。随机分为假手术组、直接脑缺血/再灌注组、吸入2 h 1.5 MAC异氟醚脑缺血/再灌注组和吸入纯氧2 h脑缺血/再灌注组, 全脑缺血15 min后分别再灌注6 h。再灌注6 h的大鼠进行磷酸化c-Jun（p-c-Jun）的免疫印迹和免疫组化检测。结果 缺血前吸入1.5 MAC异氟醚组大鼠的c-Jun磷酸化水平明显低于直接脑缺血/再灌注组和吸入纯氧2 h脑缺血/再灌注组（P0.05）。结论 异氟醚抑制c-Jun蛋白的磷酸化可能是其对大鼠缺血/再灌注性脑损伤产生保护作用的机制之一。 【关键词】? 脑；缺血/再灌注损伤；异氟醚； ??? Abstract: Objective? To observe the focal cerebral ischemia/reperfusion-induced phosphorylation of c-Jun in rats and investigate the effect of isoflurane. Methods?Animal model of global cerebral ischemia was established by ligation of bilateral common carotid and vertebral arteries (four vessels). Healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups: sham operation group (S), ischemia/reperfusion group (I/R), 2 h 1.5 MAC isoflurane preconditioning+ischemia/reperfusion group (I/R+Iso) and 2 h pure O2 inhalation+ischemia/reperfusion group (I/R+O2). 15 min after global cerebral ischemia, the rats were allowed 6 hours of reperfusion. Determination of phosphorylation of c-Jun was performed by Western blotting and immunohistochemistry. Results?The phosphorylation levels of c-Jun in I/R+Iso group was markedly lower than that in I/R and I/R+O2 groups (P0.05). Conclusion?Isoflurane is able to inhibit the phosphorylation of c-Jun, which might be one of its protective mechanisms in the ischemia/reperfusion-induced brain injuries in rats. ??? 近年的研究表明，吸入性麻醉剂异氟醚（Iso）能明显延长缺血/再灌注（I/R）性脑损伤的神经系统和组织的能量输出，对缺血/再灌注性脑损伤具有明显的保护作用［1］，但并没有阐明其保护作用的分子机制。一般认为,脑缺血/再灌注可引起脑神经细胞凋亡及相关基因的表达,异氟醚可能是通过影响细胞凋亡过程中相关因子或蛋白的表达,对缺血/再灌注性脑损伤起保护作用。有文献表明磷酸化c-Jun（p-c-Jun）与缺血/再灌注性脑损伤密切相关［2］，p-c-Jun是JNK信号通路的活性底物,JNK激酶磷酸化其特异性底物c-Jun核转录因子,p-c-Jun进入核内形成AP-1进而影响基因的表达调控［3-4］,其表达程度反映了脑缺血后神经元死亡或凋亡的程度［5］。本实验拟通过异氟醚预处理全脑缺血/再灌注的大鼠模型，研究异氟醚对p-c-Jun的影响，以期探寻异氟醚神经保护作用的分子机制。 ??? 1? 材料和方法 ??? 1.1? 实验动物及材料? 清洁级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠，体重250～300 g，徐州医学院实验动物中心提供。异氟醚由日本Dinabot公司提供；一抗（anti-p-c-Jun和anti-c-Jun）由Santa Cruz