利用siRNA抑制NF-κBp65蛋白表达对Ⅱ型血管内皮细胞激活影响研究.pdf

利用siRNA抑制NF．KB p65世白的表达对U型IfIL管内皮细胞激活的蟛响的研究 鬯史妊塑 中文提要 背景： 器官移植现在已经成为治疗终末期器官功能衰竭的有效手段，为缓解l临床同 种供体的不足．异种器官作为最可能的供体来源越来越受到重视。然而，异种器 官移植作为远缘移植，其面I临的排斥反应较同种移植更为强烈、复杂。目前，异 种移植面临的主要障碍是延迟性排斥反应，在这一过程中，由诱生抗体诱导的移 植物II型血管内皮细胞激活是异种移植物功能丧失的关键。本课题利用RNA干扰 干扰RNA(siRNA)对异种移植延迟性排斥反应中II型血管内皮细胞激活的抑制 作用，探讨RNA干扰技术在异种器官移植中的应用前景。 方法： 1．将鼠明小鼠(体徽20．259)颈椎脱臼处死，无菌状态下完整取出其胸、腹 主动脉，利用檀块法在含毒20％胎牛血清的DMEM螭蓁滚中进行小鼠动昧血镣内 爱缝鼹的爨代纛绩伐培养。餐耋稳差纛徽镜下露察海皮绥您懿形态稻生长姆豫， 进行血管肉皮细胞中Ⅷ因予相关抗原的检测鉴定。 2．设计并体外化学禽成小鼠NF．1国p65的siRNA；同时筛选对小鼠血管肉皮 缨燕(EOMA)寿较蓑转梁效率戆转絷试蘩