山茱萸提取液制备及其抗心律失常活性研究.pdf

中文摘要 采用系统溶剂萃取法进行分离，分别制取不同组分的提取液，即 总提取液、乙醚提取液、乙酸乙醋提取液、正丁醇提取液以及提取残 余液。 采用薄层色谱法对山茱英中熊果酸 (ursolicacid)和马钱素 (loganin)进行鉴别。 采用电位滴定法测定总有机酸 ((totalorganicacids)含量，考察精 密度和稳定性试验。 研究分光光度法测定总普 (totalglycosides)的含量。取山茱英水 提液，稀释后用大孔吸附树脂层析柱上吸附后再洗脱，用显色剂显色 后的溶液进行光谱扫描，分别与人参二醇、桅子昔、马钱素和莫诺营 加入显色剂显色后的溶液进行光谱扫描结果比较，确定测定波长和对 照品。在此条件下，考察不同温度、不同时间对显色的影响，确定显 色温度和时间。取马钱素对照品配制成系列浓度的溶液以制备标准曲 线绘制，并进行回收率测定和稳定性考察。 高效液相色谱法测定马钱素(loganin)和莫诺昔(morroniside)的 含量。采用PE-250型高效液相色谱仪;色谱条件为Kromasil-1000,s色谱 柱 ((4.6X150mm,5}Lm);LC-480型二极管阵列紫外检测器，检测波 长分别为马钱素237nm，莫诺普240m ;流动相为0.05mol-L-磷酸二氢 钠缓冲液一乙睛 (6.4:1);流速0.5mL-min一。配制系列浓度的马钱素 和莫诺普对照品溶液，绘制标准曲线。并依法测定回收率和精密度。 分别配制对照品溶液和供试品溶液。吸取对照品溶液与供试品溶液各 10pL，注入液相色谱仪，测定，记录峰面积，计算供试品溶液中马钱 素和莫诺营的含量。 结果:采用三因素三水平进行考察，最佳方案为A,BIC3，优选后 的最佳提取条件为水煮提取3次，每次2小时，水的用量为药材的8 倍。确定了提取液的制备工艺。除翰质，调整pH值和活性炭脱色，解 决了提取液的澄明度问题。采用阳离子树脂交换法除去了过量的钾离 子。 制订了总提取液的质量标准。建立总提取液的薄层色谱法 T〔LC) 鉴别，样品液和对照品溶液在相同位置上呈显相同颜色的斑点;制订 提取液的含量测定方法，即用电位滴定法测定总有机酸，分光光度法 2 中文摘要 测定总普，高效液相色谱法 (RP-HPLC)测定马钱素和莫诺昔的含量。 采用分光光度法测定总昔，选定的测定波长为530nm。马钱素作为 对照品，测定吸收度;以吸收度对马钱素浓度作图，绘制标准曲线， 其回归方程为C=0.025+0.1141A，r-0.9999(n=5)。样品液的总普含量 为18.40mg-mL-l,RSD为1.56%;在不同温度下和放置不同时间，考察 样品的稳定性，结果表明样品溶液在8小时内相对稳定。高、中、低三 种不同浓度的平均回收率及相对标准偏差(RSD)分别为98.03%,0.53%; 98.20%,0.32%;98.16%,0.23%0 高效液相色谱法 (RP-HPLC)测定马钱素和莫诺昔的含量。色谱 条件为Kromasil-1OOC,:色谱柱 (4.6X150mm,5gm);0.05mo1-L1磷酸 二氢钠缓冲液一乙睛 (6.4:1)为流动相;流速为0.5mL-min1;检测波 长分别为马钱素237nm，莫诺营240nm。在此色谱条件下，以马钱素和 莫诺普的质量 (99)为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，其 回归方程及线性范围分别为马钱素Y=2.1694X-0.1862(r=0.9999)， 0.5525-2.7625gg(n=5):莫诺昔Y=1.9369X-0.0164(r--0.9996)， 1.1565--5.7825gg(n=5)。回收率试验采用高、中、低三种不同浓度进 行测定，马钱素的平均回收率和相对标准偏差(RSD)分别为98.94%, 0.41%;99.34%,0.25%;99.39%,0.19%。莫诺昔的平均回收率和相 对标准偏差分别为99.02%,0.35%;99.36%,0.11%;99.40%,0.09%0 精密度试验结果，马钱素和莫诺普的RSD值分别为0.58%,0.67%, 0.43%和0.55%,0.31%,0.57%0 取不同批次的样品溶液，按测定方法项下同法操作，求得峰面积， 计算马钱素和莫诺普的含量。马钱素的平均含量为4.0