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流式细胞术研究局灶性大鼠脑缺血再灌注损伤后白细胞渗出和L-选择素表达 中文摘要 流式细胞术研究局灶性大鼠脑缺血再灌注损伤后白细胞 渗出和L．选择素表达 中文摘要 目的；在脑缺血的病理机制中炎症反应起着重要作用，小神经胶质细胞、巨噬 细胞的活化和白细胞的渗出是中枢神经系统炎症反应的关键步骤。脑缺血后炎症反应 有两个过程：小神经胶质细胞的活化和血管周围、脑实质内巨噬细胞的出现；周围炎 症细胞的游走和渗出。粘附分子介导粘附损伤过程和神经细胞损伤的关系密切。选择 素是血管粘附分子大家族中的一大类成员，参与介导脑缺血再灌注损伤中的炎症反 应，导致缺血区脑组织损伤。其中L．选择素表达于多种白细胞，是白细胞表面标志。 本课题研究缺血脑组织的L选择素表达和白细胞渗出，以说明L．选择素介导白细胞 渗出在脑缺血再灌注损伤中的作用。 过去已经应用形态学，免疫组化，生物化学的方法来研究动物模型脑缺血病灶的 炎症反应。这些方法在评价炎症细胞渗出抑制剂的有效性时，通常采用组织切片上细 胞计数的办法，非常耗时且准确性欠佳。而与这些方法相比较，应用流式细胞术可以 定量和定性分析局灶性鼠脑缺血再灌注模型的炎症细胞，具有速度快、精度高、准确 性好等优点。 材料和方法：采用机械分离法制备脑单细胞悬液。在流式细胞术中使用如下抗 Anti Anti RatCD62L，PE-MouseRat 体：FITC．Mouse CD45(白细胞表面抗原)以 及相关同型对照抗体。将66只SD大鼠分为假手术组，脑缺血再灌注组(模型组) 和人工合成B选择素干预组(干预组)，采用线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型。 脑缺血侧【广选择素表达、白细胞渗出和分析人工合成E．选择素的抑制作用。。 经表达，再灌注6h达高峰，再灌注24h、48h明显减少；模型组CD45表达在再灌注 流式细胞术研究局灶性大鼠脑缺血再灌注损伤后白细胞渗出和L．选择素表达 中文摘要 干预组CD45在再灌注12h、24h、48h时间点的表达明显低于缺血再灌注组(P0．05)。 结论：大鼠脑缺血再灌注损伤后L-seleetin的明显上调，说明它介导白细胞和 EC的粘附，参与脑缺血再灌注损伤的病理过程。大鼠脑缺血再灌注的早期白细胞渗 出较少，再灌注12h～24h开始有较高的表达，后逐渐增多。人工合成B选择素能够 明显抑制L-seleetin的表达，达到抑制白细胞与EC的粘附作用，使白细胞的渗出明 显减少，对大鼠脑缺血再灌注损伤起到保护作用。应用流式细胞术来分析鼠脑组织是 可行的，能够快速、可靠地分析局灶性鼠脑缺血再灌注模型的神经系统的炎症反应。 关键词：白细胞渗出，L-seleetin，脑缺血再灌注损伤，流式细胞术 作者 黄亚波 导师 张世明 Ⅱ 流式细胞未研究局灶性大鼠脑缺血再灌注损伤后白细胞渗出和撕圭择素表达 英文摘要 to Theuseofflow evaluate infdtration cytometry leukocyte andthe ofL-selectin focal expression following cerebralischemiainrat Abstract centralroleinthe of a cerebralisc