细胞色素P4502D6基因多态性研究.pdfVIP

细胞色素P450．2D6基因复查：堕至开究 浙江大学湖滨校区生理学 95级博士研究生：陈枢青 PeterJWedlund(教授) 导师：余应年教授，Dr 摘 要 P450 ／细胞色素P450 2D6，CYP2D6)参与五十多干4懂≮物的 2D6(Cytochrome 代谢，是细胞色索类药物代谢酶中最为重要的一种。该酶的多态性现象普遍存 √在。欧dIt人种中发现有7-10％的慢代澍者，亚洲人种中慢代鲥者的发生率为1— 2％。慢代谢者发现是由于其丛冈缺陷造成的。已报道的CYP2D6酶活性缺陷的 簿位基田有：CYP2D6A是由丁第5外显子第2637位A缺火造成其后面的序列 读框位移致使酶活性缺陷：CYP2D6B是第3号内含子与第4号外显予之问1934 795T缺火，致使表达产物I51似 引起酶活性缺陷。CYP2D6T姓3号外显子1 因是CYP2D6基因第2703．5位AGG丢失，造成了表达产物第281位赖氨酸的 et a1．1991)，而其他 缺失，体外实验中发现其是酶活性缺陷型等位基I困(Tyndale 实验又认为CYP2D6C不影响表达产物的活性(Brolyetal．J993)。Daly(1994)在加 基因2064G—A突变，造成表达产物212位上谷氨酸变成甘氨酸，从而引起酶 的存在，造成了CYP2D6的多态性现象。本研究在此基础上，对CYP2D6的表 型分型、基因分型及其临床意义进行了更为系统深入的研究。 首先利用加大样本量，提高检测灵敏度，并将右美沙芬与其代谢产物去甲 右美沙芬分组测定，建立了新的CYP2D6表型分型法。该法对右美沙芬的检测 灵敏度可达lndml，测定标准曲线在100倍范围内呈线性，R2在0．995．1．000 之间。再利用等位基因特异扩增法(AsA)为基础建立了CYP2D6基因分型法， 和CYP2D6*6。测定方法快速、准确、重复性好，阳性对照和阴性对照说明实 验结果可靠并无污染问题。对168例实验对象进行了基因分型与表型分型对照 测定，结果发现吻合率为100％。说明基因分型法可准确地预测表型分型，并能 酶活性，可以不必测定cYP2D6C和CYP2D6*6。 对CYP2D6纯合子与杂合子快代谢者的右美沙芬代谢比率进行统计后，发 现了纯合子快代谢者与杂合子快代谢者之间在代谢比率上也有差异(表1)。 本研究提示CYP2D6基因表达时，基因拷贝数起着一定的作用。 表1 168倒表型测定结果的统计数据 Wt：野生型，M：突变型，MR：代{身f比率 对有CYP2D6酶缺陷型等位基因的携带者及其家属，九个家庭共38人进 行了基因分型，发现CYP2D6酶缺陷呈常染色体隐性遗传，符合孟德尔第二定 律。 在临床研究时，对74名抑郁症患者(其中18人对三环类抗抑郁药物有副 反应)进行基因分型和表型分型分析(表2)。结果显示有副反应组所拥有的 CYP2D6酶缺陷等位基因比无副反应组和对照组高一倍多，说明CYP2D6基因 分型对临床预测药物作用副反应易感者有很大意义。 2 表2两组受试者等位基因的发生频率 等位基因数 M／(M+W) 组别 突变等位基因(M)野生等位基因(w) 在对新药临床试验中受试者进行CYP2D6基因分型时，136位来自于肯塔 基火学的受试者是通过广告招募的，138位来自于三个不