E2F1基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC7901顺铂多药耐药性的逆转.pdfVIP

空垡壁遁盘查垫!堡生!旦筮堑鲞箜!塑鱼迪』垒!!!!：塑垦篓!垫!垒，∑亟：堑：№：! ．基础研究． E2F一1基因沉默对人胃癌耐药细胞株 SGC7901／』『顷铂多药耐药性的逆转 廉超杨杰王晓通谢玉波 肖强 【摘要】 目的探讨E2F．1基因沉默后对人胃癌顺铂(DDP)耐药细胞株SGC7901／DDP多药耐 药性的影响及可能的作用机制。方法将人胃癌耐药细胞株SGC7901／DDP接种于6孔板，并分为以 E2F一1基因沉默重组慢病毒颗粒Lv—shRNA—E2F一1感染的SGC7901／DDP细胞(实验组)、以对照慢病 (空白对照组)。采用Westernblot技术检测各组细胞中E2F一1蛋白的表达，采用四甲基偶氮唑蓝法检 测阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对各组细胞的半数抑制浓度(Ic，。)，采用流式细胞术检测各组细胞中阿 霉素的泵出率和细胞凋亡率，采用半定量RT．PCR和Westernblot技术检测各组细胞中多药耐药基因1 mRNA和蛋白的表达水 (MDRl)、多药耐药相关蛋白(MRP)及凋亡相关基因cyclinDI、c—Myc、Skp2 平。结果实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901／DDP细胞中E2F一1蛋白的相对表达量分别为 0．794±0．033、1．4874-0．082和1．5114-0．084，实验组SGC7901／DDP细胞中E2F一1蛋白的相对表达 量较阴性对照组和空白对照组分别下降46．6％和47．5％(P0．01)。阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对实 验组SGC7901／DDP细胞的Ic，。均较明性对照组和李白对照组明显降低(均PO．01)。实验组、阴性 4- 对照组和空白对照组SGC7901／DDP细胞中阿霉素的泵出率分别为(0，164-0．01)％、(0．37 0．01)％和(0．354-0．02)％，实验组SGC7901／DDP细胞中阿霉素的泵出率明显低于阴性对照组和空 白对照组(P0．01)。实验组、阴性对照组和空白对照组SG卵90I／DDP细胞的凋亡率分别为(33．82± 1．26)％、(17．344-0．81)％和(13．16±1．06)％，实验组SGC7901／DDP细胞的凋亡率明显高于阴性 对照组和空白对照组(P0．01)。与阴性对照组和空白对照组比较，实验组SGC7901／DDP细胞中 MDRl、MRP、cyclinD1、c—Myc和Skp2mRNA及蛋白的表达水平均明显降低(均P0．01)。结论沉 默E2F．1基因的表达叮有效提高人胃癌耐药细胞株SGC7901／DDP对化疗药物的敏感性，并可直接或 问接下调经典多药耐药相关基因MDRI和MRP的表达，从而逆转胃癌细胞的多药耐药性，其机制可 能与cyclinDI、c—Myc和skp2的表达下调有关。 【主题词】E2F—I基因；胃肿瘤；抗药J眭，肿瘤；顺铂 Reversionof resistanceofhuman cancerSGC7901／DDPcells E2F-1 mullidrug gastric by gene Lian Gastrointestinal silencingChao+，Yang五e，WangXiaotoag，XieYubo，Xiao of Qiang,+Department andGland First of Medical Surgery，theAffiliatedHospitalGuangxi University，Nanning530021，China author：Xiao Corresponding Qiang，Entail：xiaoqian920050@aliy