胚胎大鼠大脑额叶皮质神经干细胞的分离、培养与鉴定.DOCVIP

临床医学论文-胚胎大鼠大脑额叶皮质神经干细胞的分离、培养与鉴定 ????????????? 作者：徐汉荣,晋光荣,张海军,赵连东,顾宝荣? ［摘要］目的:探讨从胚胎大鼠大脑额叶皮质分离培养神经干细胞(neural stem cell, NSCs)的方法及NSCS的特性。方法:将145d胎龄的大鼠额叶皮质脑组织制备成单细胞悬液，于含EGF 和bFGF 的DMEM/F12无血清培养液中培养,形成原代细胞球后，进行单细胞克隆传代扩增。 免疫荧光组化方法检测克隆球Nestin、Map2、 GFAP抗体标记情况。结果:原代培养2周后，可形成大量悬浮生长的神经球，BrdU和Nestin检测呈阳性，诱导分化后呈Map2、GFAP阳性。 结论:可从胚鼠脑皮质中分离培养纯化、扩增传代获得NSCs，经诱导后可以分化为神经元和星形胶质细胞，可作为细胞替代治疗中枢神经系统疾病的供体来源。 　　［关键词］神经干细胞;纯化;诱导分化；大鼠 　　神经系统创伤、缺血及退行性疾病的治疗一直是困扰医学界的一个难题。人和哺乳动物体内及胚胎体内神经干细胞(neural stem cells, NSCs)的发现, 为解决这一难题点燃了新的希望。目前，众多学者从各种途径探索治疗神经系统疾病的生物材料及治疗方法［12］。NSCs是一类具有自我更新和多向分化潜能的特殊细胞。利用它不仅可以探讨神经系统发育的分子机制,也可作为细胞