标准曲线实时PCR法定量检测宫颈癌及癌前病变HPV16E6、E7基因DNA和RNA研究.pdfVIP

标准曲线实时PCR法定量检测宫颈癌及癌前病变 HPV-16E6.E7基因DNA和RNA的研究 导 师:彭芝兰 教 授 指导小组:王 和 教 授 姚先莹 教 授 研 究 生:陈悦悦 摘 要 目的 探讨HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA含量与宫颈癌发生发 展的关系，以及实时PCR和RT-PCR检测HPV-16E6和E7基因的临床应用 价值。 方 法 将HPV-16E6和E7基因的PCR产物进行T一克隆，置备含E6 和E7基因的质粒，以此作为标准品建立标准曲线实时PCR方法，分别对 3种宫颈癌细胞株、98例TCT标本 (包括16例正常对照、22例ASCUS, 30例LSIL,30例HSIL)和55例新鲜宫颈组织标本 (包括16例正常对 照、39例浸润性宫颈鳞癌)进行HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA拷 贝数的定量检测，并与普通PCR和RT-PCR结果进行比较。所有数据均应 用SPSS8.0软件进行统计处理。 结果 1，建立