超氧化物歧化酶对自体静脉移植内膜增生的影响.pdfVIP

硕士学位毕业论文 超机化物咬化晦对自体粉脉移植内膜增生的影响 超氧化物歧化酶对自体静脉移植内膜增生的影响 摘 要 丫 ?81098 前言:自体静脉移植术后再狭窄仍是影响其远期疗效的关键。人们已 知活性氧自由基在动脉粥样硬化形成，动物损伤再狭窄等方面的重要作 用。本实验研究局部应用超氧化物歧化酶 (SOD)对自体静脉移植内膜增 生的影响。 方法:取54只Wistar大鼠，将颈静脉移植于腹主动脉，随机分为三 组，每组18只，术中分别应用溶入SOD的pluronicgel(实验组)，单纯 pluronicgel(实验对照组)涂于移植静脉表面及无施加因素 (空白对照 组)。术后第三天检测移植静脉的SOD活力与丙二醛 (MDA，脂质过氧化 产物)浓度，术后第14天、28天取下移植静脉行HE染色，verhoeff弹力纤 维染色和PCNA免疫组化染色，检测内膜增生情况。 、一厂结果:术后第三天，实验对照组与空白对照组移植静脉的MDA浓度明 显高于实验组 (分别为97.76士21.01,94.64114.12及36.62士12.60nmol/100 mgprotein,p0.05)，实验对照组与空白对照组SOD活力明显低于实验组 (分别为8.06士2.29,8.44士2.58及26.18士4.90NU/mgprotein,p0.05)， 术后第14天及28天，实验组移植静脉内膜厚度明显低于对照组 (p0. 05)，PCNA染色阳性细胞亦明显低于对照组(p0.05)丫 结论:本研究发现静脉移植术局部应用SOD，于术后三天可出现SOD 活力增加，并减轻脂质过氧化，手术后14天及28天发现内膜增生减轻。这 些发现提示:活性氧自由基及引起的脂质过氧化参与了静脉移植术后内膜 增生过程，并提示SOD对抑制自体静脉移植狭窄有潜在的治疗作用。 关键词:自体静脉移植 内膜增生 超氧化物歧化酷 脂质过氧化 局部缓释 硕士学位毕业论文 超札化物咬化晦对自体静脉移植内膜增生的影响 随着人们生活方式的改变和人类平均寿命延长，以动脉粥样硬化为主 的肢体远端缺血性疾病的发病率逐年上升，严重影响患者与家属的生活和 工作，严重者可导致截肢，甚至危及生命。目前，利用自体静脉行旁路转 流术是最常用的治疗手段，近期疗效确切，但术后五年移植静脉狭窄的发 生率可达20-75叼11。因此，寻求一种抑制移植静脉狭窄的方法是进一步提 高其疗效的关键，研究表明，移植静脉狭窄由三个独立而又相互联系的病 理过程组成:血栓形成，内膜增生，动脉粥样硬化a1。目前认为，其主要 的病理学改变是中膜平滑肌细胞的多种因素作用下增生并向内膜迁移，分 泌细胞外基质，形成内膜增生[3,41。近来发现，活性氧自由基产生而引起的 脂质过氧化在此过程中发挥作用[[57]，超氧化物歧化酶 (SOD)是一组金属 酶，1969年由McCord和Fridovich首次发现并提取出来，它可催化歧化反应特 异作用于超氧阴离子 (OZ-)，将其分解为过氧化氢 (H202)和氧气 (02)， 从而消除体内其它活性氧自由基的派生源，保护细胞免受损伤。本实验采 用局部缓释技术，将SOD溶解于pluronicgel中，于大鼠静脉移植术中涂于 移植静脉的表面，观察其对内膜增生及平滑肌细胞增生的影响。 材料与方法 一、实验材料 1.实验动物:Wistar大鼠54只，雌雄不拘，体重250-3008，由中国医科 大学实验动物中心提供。 2，实验药品:超氧化物歧化酶 (50001U/ml，由中国医科大学公共卫生 学院提供)，SOD测定试剂盒 (购自南京建成生物工程研究所)，硫代巴 比妥酸 (TBA)，盐酸，正丁醇，甲醇及1,1,3,3一四乙氧基丙烷 门FEP) (均由中国医大公共卫生学院提供)，pluronicgel(购自Sigma公司)， PCNA抗体 (购自北京中山公司)，SP法试剂盒 (购自北京中山公司)， 一2- 硕士学位毕业论文 超札化物攻化踌对自体扮脉移植内膜增生的影响 10%水合氯醛 (购自中国医大一院药局)。 3.实验仪器:lox手术显微镜 ((SXB-I型，上海)，显微外科器械 (上 海)，721分光光度计 (上海)，计算机图像分析仪 (RealTimeImage An