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特发性肺纤维化发病机制研究 中文摘要 特发性肺纤维化发病机制研究 中文摘要 背景：特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis ，IPF)是一种原因不明的 弥漫性肺病,进展迅速、中位生存期短，死亡率高。随着对疾病认识的深入，2011年 有了新的临床诊断、治疗指南和标准。非常遗憾的是，尽管对IPF有了很多研究，目 前对于如何治疗IPF仍无良策，缺乏具有确定治疗效果的药物，肺移植是终末期IPF的 唯一治疗选择。本研究从多个角度探讨肺纤维化的发病机制，试图寻找治疗肺纤维化 的新方法。研究包括三部分： 第一部分：IPF 患者HLA 基因遗传背景的研究 目的： IPF发病与HLA基因遗传背景的关联性。方法：先后收集典型IPF （UIP 型）患者67例，进行HLA基因多态性检测，并与同源中华骨髓库南方中心（上海）正 常人群进行对照分析。结果：IPF组基因频率HLA-A* 03 ，-B* 15 ，-B* 40 ，和连锁基 因的HLA-A2B15 ，-A2B40 ，-A11B15 ，-A24B58显著上升。 第二部分：IPF 患者肌成纤维细胞的生物学特性研究 目的：对比正常人来源的肺成纤维细胞（fibroblast ）和IPF来源的肺肌成纤维细 胞(myofibroblast)生长、生物标志、外分泌蛋白等生物学特性。方法：体外分离培养 正常人肺组织来源的fibroblasts和IPF患者来源的myofibroblasts ，进行细胞纯度鉴定、 生长曲线测定、诱导试验及两种细胞外分泌细胞因子、趋化因子检测。结果：正常人 肺组织来源的fibroblasts可经TGF β诱导为α-SMA阳性的myofibroblasts 。原代获取的 myofibroblasts纯度在90 ％以上，形态和生长特性与fibroblasts差别不大，但高表达外 分泌蛋白GM-CSF, IL-6，IL-8, MCP-1。 第三部分：mTOR 信号通路在IPF 中的作用 目的：探讨mTOR信号通路在IPF发病机制。方法：通过Rapamycin特异性抑制 I 中文摘要 特发性肺纤维化发病机制研究 mTORC1 ，Nvp-bez235抑制mTORC1和 mTORC2 ，对比研究mTOR信号通路，尤其是 mTORC2 在fibroblasts 向myofibroblasts肌化过程、骨架蛋白形成中的作用。结果： Rapamycin 可阻断TGF β诱导fibroblasts 细胞的S6 活化，α-SMA 表达略减弱； Nvp-bez235可阻断Akt 、S6活化，α-SMA表达明显受抑。 结论：1.IPF 与HLA-A* 03 ，-B* 15 ，-B* 40 基因背景密切相关。2.fibroblasts 可 经TGF β体外诱导为myofibroblasts 。3.myofibroblasts 外分泌大量GM-CSF, IL-6，IL-8, MCP-1。4. mTOR 信号通路，尤其是mTORC2 在fibroblasts 向myofibroblasts 肌化过 程、α-SMA 表达过程中具有重要作用。 关键词：特发性肺纤维化，肌成纤维细胞，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 作 者：张 稷 指导老师：黄建安、徐凯峰 课题资助：国家973 项目课题(2009CB522106) II The pathogenesis of Idiopathic pulmonary fibrosis Abstract