Bid蛋白表达在甘油致大鼠急性肾衰竭时促肾组织细胞凋亡机制及山莨菪碱干预作用研究.pdfVIP

中文摘要 Bi d蛋白表达在甘油致大鼠急性肾衰竭时促肾组织细 胞凋亡机制及山莨菪碱干预作用的研究 摘 要 目的：过度训练引起横纹肌溶解，可导致急性肾功能衰竭， 其病死率高达25％。如何防治过度训练所致急性肾衰竭已成为 运动医学、军事医学和临床医学的重要课题。本实验通过给大 鼠肌肉注射甘油模拟过度训练致肌肉损伤所致的急性肾衰竭。 利用此模型研究趟Ⅻ时‘肾组织细胞凋亡及Bid蛋白表达的促 凋亡机制，观察山莨菪碱对甘油致ARF的保护作用。 方法：1实验分组：健康SD大鼠45只，体重1 80．2509， 分为三组：对照组、急性肾衰组和山莨菪碱组。根据观察各时 间组又分为三个亚组即甘油注射后1小时组、甘油注射后6小 时组和24小时组。2建立急性肾衰竭模型：各组大鼠禁水24 小时，急性肾衰组大鼠给于50％甘油生理盐水1 0m1爪g，双后 5 肢肌肉注射；山莨菪碱组大鼠在给于50％甘油生理盐水前1 分钟腹腔注射盐酸山莨菪碱lOmg瓜g；对照组大鼠双后肢注射 生理盐水1Oml爪g。3取材：各组实验大鼠使用乙醚麻醉，腹 部正中切开，于下腔静脉采血，分别注入干管和抗凝管待测， 并摘取双肾，一个置入4℃4％多聚甲醛中固定，一个置于．80℃ 冻存。4观察指标及方法：使用全自动生化仪检测血生化指标； 制作病理切片，观察病理改变；应用n心EL技术检测肾组织 细胞凋亡；应用免疫组织化学方法检测肾组织细胞中Bid和 caspase．8蛋白的表达；应用WestemBlotting方法检测肾组织 中Bid蛋白的活化情况。 中文摘要 结果：1肌肉注射甘油后血清中各生化指标都明显升高， BUN于甘油注射后6小时开始升高，24小时达到高峰(P O．0 1、)。Scr和CK于甘油注射后1小时开始升高，24小时达到 高峰(PO．01)。山莨菪碱组各项指标也升高，但与舢强组比 较幅度明显下降(PO．05)。2急性。肾衰组注射甘油后1和6小 时1肾组织光镜下观察以细胞凋亡为主，24小时以细胞坏死为 主。山莨菪碱组肾组织病理变化明显轻于急性肾衰组。3对照 组大鼠肾组织偶见凋亡细胞，急性肾衰组注射甘油后l小时外 髓小管出现阳性凋亡细胞，随着时间推移，阳性凋亡细胞数量 增加、范围扩大，到24小时达到高峰。山莨菪碱组阳性凋亡 细胞明显减少(PO．O 1)。4Bid蛋白和caspase．8在对照组正常 大鼠肾小管上皮细胞中弱表达，急性肾衰组于注射甘油l小时 后表达增强(PO．05)，6小时达到高峰(P0．O1)，24小时表达 中以完整的形式22kDa存在。急性肾衰组于甘油注射后1小时 Bid蛋白开始酶解成15∞a形式—．tBid，到6小时酶解活化达 到高峰。山莨菪碱组Bid蛋白酶解活化低于急性肾衰组。 结论：l大鼠肌肉注射甘油可导致肾功能及组织结构的明 显变化，这些变化可用于模拟过度训练致横纹肌溶解所致的急 性肾衰竭。2大鼠肌肉注射甘油早期肾组织以细胞凋亡为主， 晚期以坏死为主，说明肾组织细胞凋亡在急性肾衰竭早期发挥 重要作用。3大鼠肌肉注射甘油后，肾组织细胞中大量的Bid 蛋白被酶解活化，并且caspase．8活化表达增强，这些变化是 急性肾衰竭早期细胞凋亡的分子机制。4山莨菪碱可减轻甘油 肌注致创RF大鼠肾损伤早期的细胞凋亡和晚期的细胞坏死， 中文摘要 肾细胞凋亡，这可能是山莨菪碱。肾保护作用的分子机制之一。 凋亡；山莨菪碱 英文摘要 ————————————————————————————————————————————————————————————一 Bidactiv