水稻非亲和互作中NO产生及其对过敏反应调控.pdf

摘要 一氧化氮(Nitric Oxide，简称NO)是～类脂溶性的可扩散小分子物质，可以作为细胞 间或胞内信号分子。最初NO在人体和动物神经系统、心血管系统以及免疫系统的作_E}；|引起 了人们的关注，尤其在动物系统中NO的研究较为成熟。近年来研究发现，植物也具有一套 与动物类似的NO产生系统，NO参与调节了植物的多种生理过程，尤其是NO在植物抗病 过程中发挥了重要作用。然而，NO及其信号途径在水稻一病原细菌分子互作中的作』{|f及其 机理尚不清楚。 cv 水稻品种日本晴(OryzaesativaNipponbare)和水稻白叶枯病菌(拍Hthomonasoryzae pv．oryaae简称Xoo)基因组序列的公布发表，使其互作体系作为病原物～植物分子互作的 研究模式系统之一。本研究分别用亲和的病原细菌一水稻白叶枯病菌和不亲和的非寄主病原 细菌一辣椒细菌性斑点病菌(Xanthomonas campeslris 日本晴悬浮培养细胞互作体系为研究对象，研究内容包括：1．NO的产生，2．水稻一氧化氮 合成酶(NOS)的活性，3．NO在过敏性反应(HR)中的作用。 研究结果表明，1．在Xcv与水稻细胞非亲和互作中，可产生浓度高于522pM的NO；而 在Xoo与水稻细胞亲和性互作过程中，未能检测到NO。2．在非亲和性互作过程中，诱导型 显抑制其活性：在亲和性互作中，iNOS酶活性在互作初期略有上升，但29h后明显被抑制。 3．在非亲和性互作中，水稻细胞出现染色质凝聚、边缘化等凋亡现象，但DNA不降解成大 片段或“DNA Ladder”：防卫基因苯丙氨酸解氨酶基因∞∽、过氧化物酶基因(pox)和谷胱营 肽转硫酶基因C邪，)均受到诱导表达；NO清除剂PTIO处理非亲和性互作体系后，未发现水稻 细胞凋亡，防卫基因表达受到抑制；而在亲和性互作中，细胞出现类似坏死的特征，水稻防 卫基因表达受到抑制。 本研究比较了在与不同病原细菌互作过程中水稻在基因、生化以及细胞水．平上的不同表 现，明确了水稻悬浮细胞凋亡的特征。首次利用oxyhemoglobinassay在单子叶模式植物水稻 中测定了iNOS酶活性，初步明确了在Xcv与水稻细胞非亲和性互作中NO产生来源及其对 过敏性反应的调控作用。本试验结果为深入研究NO在植物中的信号传导作用奠定了基础， 并且为分子设计和研发新型药物(抗菌素、农药和防卫激活剂)提供分子靶标。 关键词：水稻细胞；病原细菌；一氧化氯：一氧化氮合成酶；过敏反应 V NitricOxideGenerationandIts Mediation to HypersensitiveResponseDuring InteractionofRice Incompatible Abstract Nitric diffusibleandwith low oxide(N0)ishighly very solubility solutions，which aqueous couldfunctionasanintracellularand intercellularmolecule．The signaling widespreadbiological ofnitricoxidewasfirstobservedinthe nervousandimmune significance cardiovascular,central The