丹参注射液对培养乳鼠心肌细胞缺糖缺氧损伤的保护作用.pdfVIP

毕业论文 湖北中医学院硕士研究生___ _ 一 一 一 一 一 一 一 中文摘要 目的:(IA血性心脏病是指由于冠状动脉循环改变引起冠状 血流和心肌需求之间不平衡而导致的心肌损害，它是一种严重 危害人民健康的常见病。心肌缺血性损伤常指由各种原因引起 的心肌供血量绝对性不足或相对性减少，使心肌血液供求失衡 而出现的一种心肌细胞损伤的现象。这种心肌细胞的损伤既可 发生在心肌缺血期，也可出现在血管再通、血液再灌注之后0 为了研究开发传统中医药对缺血性心脏病的作用，本实验采用 丹参注射液对体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞缺搪缺氧损伤 (缺 血性损伤)进行干预，观察其对损伤心肌细胞的保护作用，并 进一步探讨其机理。值得一提的是发现和证实丹参注射液对缺 血性损伤诱导心肌细胞凋亡的影响，也将对其影响心肌细胞凋 亡进行了讨论.为丹参制剂在防治缺血性心脏病的应用提供新 的科学依据，机理上增添了新的观点。 乙方法:参考Deluca及Acosta方法，稍加改进复制心肌细胞 缺血性损伤模型。将体外原代培养第4天的心肌细胞随机分为 四组 (每组8瓶细胞):正常对照组 (A组)，缺搪缺氧组 (B 组，模型组)，小剂量丹参注射液组 (C组，7.5g/1)，大剂量丹 参注射液组 (D组，15岁I)，其中B,C,D组细胞换成无血清 的DMEM培养2411使其同步化。然后将B组培养基倒掉，换成 磷酸缓冲液(PBS,PH=7.4)3ml,C,D两组分别换成含不同浓度 丹参注射液的PBS3m1,灌以99.9999%的氮气(N2)10分钟， 塞紧胶塞，37C温育611.取四组培养液上清检测乳酸脱氢酶 (LDH),a一经丁酸脱氢酶 ((x-HBDH)，收集细胞分别做透射 电镜及细胞凋亡的检测 。 始 果:(1)LDH,a-HBDH:B组LDH及a一朋DH值 湖北中R学院硕士研究生 毕业论文 均明显高于A组((P0.01),C,D两组LDII,a-HBDH值分别低 于B组 (P0.05)，而稍高于A组，但无显著性差异 (P0.05); C,D两组间LDH.a-HBDH值差异不显著 (P0.05)，说明 丹参注射液能稳定细胞膜，有效降低缺糖缺氧心肌细胞损伤时 乳酸脱氢酶及a一经丁酸脱氢酶的漏出。 (2)形态和超微结构变化:倒置显微镜下可以看到正常培 养心肌细胞胞膜完整，胞浆透亮，透射电镜下线粒体结构完好;缺 糖缺氧心肌细胞其内有空泡形成，颗粒增加，甚至细胞有变性 坏死，电镜下可见线粒体肿胀，胞膜甚不完整。两种剂量丹参注 射液组细胞也有少量空泡形成，细胞核尚正常，呈圆形或椭圆 形，电镜下仅见少许线粒体肿胀，峙少，两组间超微结构变化 不大，与正常组心肌细胞超微结构相近。说明缺糖缺氧组心肌 细胞超微结构破坏严重，丹参注射液对Alkil立有较好的 保护作用。 (3)心肌细胞凋亡:A组心肌细胞也有一定的凋亡，而B组 心肌细胞凋亡数量明显上升，与A组相比有显著性差异 (P 0.01)C.D组心肌细胞凋亡数量无显著性差异 (P0.05), 与B组相比明显下降(P0.05)，但仍比A组稍多，无显著性 差异 (P0.05)。说明凋亡是缺糖缺氧时心肌细胞死亡的重要方 式，其细胞凋亡数量明显增多。丹参注射液可以明显降低这种 损伤时心肌细胞的凋亡，从而对心肌细胞缺糖缺氧损伤起到保 护作用l·,r 结 论:丹参注射液对体外培养心肌细胞缺糖缺氧 (缺血性) 损伤有较好的保护作用，其作用是通过稳定细胞膜，降低损伤 时细胞内酶的漏出，减轻心肌细胞缺血性损害超微结构及形态 学的变化，降低心肌细胞凋亡而起到保护作用。证实了丹参注 射液在细胞水平和分子水平上保护心肌细胞的缺糖缺氧性损 #)]北中医学院硕士研究生 毕业论文 伤，为月一参注射液在心血管领域的应用提供了新的依据. 主题词 湖北中医学院硕士研究生 毕业论文