金雀黄素和姜黄素体外抑制人卵巢癌细胞株3AO及顺铂耐药株3AOcDDP增殖研究.pdfVIP

金雀黄素和姜黄素体外抑制人卵巢癌细胞 株3A0及顺铂耐药株 3A0/cDDP增殖的研究 研 究 生二黄翠萍 导 师:王 波 教 授 中文摘要 目的 探讨金雀黄素 (genistein,GNS)和姜黄素 (curcumin,Cur)对体外培养的人卵巢癌细胞株 3A0 及顺铂 (cisplatin,cDDP)耐药株 3A0/cDDP的增殖 抑制作用。 方法 体外培养人卵巢上皮性粘液性囊腺癌细胞株 3A0及其顺铂耐药亚细胞株 3A0/cDDP，采用 甲基四氮 挫盐比色法 (methyltetrazoliummethod,MTT)，检 测计算不同浓度的GNS,Cu:对肿瘤细胞的增殖抑制率 (proliferationinhibitoryrate,PIR)，并用流式 细胞术 (flowcytometry,FCM)分析细胞凋亡率，细 胞周期分布及细胞内野生型 (wildtype,wt)P53蛋 白、bcl-2蛋白、DNA拓扑异构酶11(topoisomerasell, topo11)及雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)的 表达。 结果 ①GNS和 Cur均对细胞株 3A0和细胞株 3A0/cDDP有增殖抑制作用。GNS浓度 1Dmol/L一40ti mol/L，作用时间24h至72h，对细胞株 3A0和 3A0/cDDP 细胞的增殖抑制作用均呈剂量和时间依赖性。Cu:浓度 1.25pmol/L一40Dmol/L，作用时间24h至 72h、对细 胞株 3A0和细胞株 3A0/cDDP的增殖抑制作用呈剂量和 时间依赖性。OOGNS和Cur可诱导 3A0及 3A0/cDDP细 胞凋亡 GNS0.5Nmo1/L作用48h，可使 60.80%的3A0 细胞凋亡，1pmol/L48h和 5pmol/L48h细胞凋亡率 分别为43.82%和34.74%;GNS浓度1umol/L和5umol/L 作用48h可使 34.27%和21.97%的3A0/cDDP细胞凋亡。 Cur浓度 1.25umol/L和5umol/L作用48h，使 13.81% 和 14.39%的3A0细胞凋亡，7.51%和 7.74%的3A0/cDDP 细胞凋亡。OGNS和 Cu:均对细胞株 3A0和细胞株 3A0/cDDP细胞周期分布产生影响。GNS使细胞株 3A0 产生GO/G1期阻滞，G,/M期比率增加;Cur1.25umol/L5 umol/L作用48h，使细胞株 3A0S期分布比率增加， 而GZ/M期比率下降。GNS和Cur均可使3A0/cDDP细胞 株S期分布增加，Gz/M期减低。④细胞株 3A0/cDDP的 wtP53蛋白、bcl-2蛋白阳性表达率明显高于 3A0细胞 株者(p0.05)，而topoII表达下降，ER表达缺失。GNS(5 ,umol/L)作用 48h可使 3A0细胞 P53蛋白、bcl-2蛋 白表达升高。Cur(5umol/L)作用 48h，使 3A0细胞 wtP53蛋白表达增加，使 3A0/cDDP细胞 bcl-2蛋白表 达降低。GNS和Cu:均使 3A0/cDDP细胞的topo11表达 下降。’_ 结论 1)GNS和 Cur均可抑制 3A0和 3A0/cDDP 细胞株增殖，并诱导细胞凋亡。3A0细胞株对 GNS和 Cur的敏感性高于 3A0/cDDP细胞株者，但 GNS仍可 明显抑制 3A0/cDDP细胞的增殖并诱导其凋亡。(2) GNS和Cur抑制 3A0细胞株和 3A0/cDDP细胞株增殖 并诱导细胞凋亡与影响细胞周期分布有关。GNS可作 用于细胞株3A0细胞周期的Go/G,期和GZ/M期，而Cur 主要作用于 S期;在 3A0/cDDP细胞株，GNS和 Cur 均使细胞周期受阻于S期。(3)3A0/cDDP细胞的cDDP 耐药机制可能与bcl-2蛋白表达增加，topo11表达下 降有关;ER表达与cDDP耐药关系仍不清楚。 [关键词] 金雀黄素，姜黄素，体外抑制，卵 巢肿瘤，顺铂，抗药性，增殖厂研究一 STUDY ON THE IN VITRO INHIBITORY EFFECT OF GEN!STEINAND CURCUMIN ON THEPROL!FERATION OFHUMAN OVARIAN CANC