沉淀反应-液相内沉淀试验.pptVIP

沉淀反应PRECIPITATION 第一节 液相内沉淀试验 （一）透射比浊法 用于免疫沉淀反应的一些缺陷： (1)溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大，分子太小则阻挡不了光线的通过。 (2)溶液中的抗原－抗体复合物的数量要足够多。如果数量太小，溶液浊度变化太小，对光通量影响不大。 (3) 透射比浊是依据透射光减弱的原理来定量的，因此只能测定抗原－抗体反应的第二阶段，检测仍需抗原－抗体温育反应时间，检测时间较长。 （二）散射比浊法 1.速率散射比浊法 2.终点散射比浊法 用于免疫沉淀反应的缺陷 (1)因为是一次性测定光吸收值，没有考虑每一个待测样本的吸收和散射效果，可测定结果不准确 (2)测定的仍是抗原－抗体反应的第二阶段，不适合快速检测。 (3) 终点法存在反应本底，测定样本的含量越低，本底比例越大，故在微量测定时，本底的干扰是影响准确测定的重要因素。 影响免疫比浊测定的因素 1、抗原抗体比例 2、抗体的质量 抗体的特异性、效价、亲和力、R型和H型抗体 3、反应的溶液 4、增浊剂的使用 设计特点 (1)方法学的选择： Immage检测仪除保留了原有的速率散射比浊法外，新增加了近红外速率透射比浊分析，以使检测范围进一步扩大，检测敏感性和准确性进一步提高。 (2)抗原过量的检测：对反应介质中P