顺式环氧琥珀酸水解酶产生菌筛选及其产酶和固定化条件初步研究.pdfVIP

顺，t环瓴琥王n酸水解酶产生菌的筛选发其产酶和崮定化条件初步研究 I摘要 L一(+)一酒石酸是一种用途广泛的天然有机酸。主要生产方法除了， 从葡萄酒生产的副产品酒石中提取外，更多的是采用顺式环氧琥珀酸 水解酶C‘IS—epoxysuccinate 珀酸盐￡E产L一(+)一酒石酸的方法。该方法条件温和，流程简单，产率 和纯度都比较高，现在已经被广泛采用。 本研究从土样中筛选到一株产ESH的菌株，经初步鉴定为棒状 朴菌。并确定了该菌培养基的最佳碳、氮源为葡萄糖和硫酸铵，该菌 的最适生长温度为30。C，pH为7．0～7．5。发酵后得到了具有较高酶活 性的菌体细胞，酶作用温度范围为37～45。C，pH8．0～8．5。同时用培养 的菌体细胞进行了固定化研究，筛选到以卡拉胶为载体并添加一定量 的羧甲基纤维素进行固定化，最后用氯化钾硬化处理的方法。不仅获 得了较高酶活性回收率，而且有一定的硬度。用该法得到的固定化菌 体进行转化顺式环氧琥珀酸盐生产L一(+)一酒石酸的研究，连续转化十 次，都能够获得比较高的转化率，平均在92．5％。 关键词：棒状杆菌；顺式环氧琥珀酸水解酶；L．(+)一酒石酸；固定化 顺式环氧琥珀睃水解酶产生菌的筛选及其产酶和固定化条件初步州究 Abstract A isscreenedfromsoilwhichhasthe strain to abilityproduce identifiedas cis—epoxysuccinatehydrolase(ESH)，and the Afterthe examinedconditionsfor formation sp selection，we enzyme ofthestrain．Thesuitablecarbonsourceofmediumwas and 1．O％glucose suitable source was nitrogenwas(NH4)2S04．Sodiumcis—epoxysuccinate aneffectiveinducefactorforESH formation．The optimum growth ofthestrainis30℃andthe is 7．0．The temperature optimumpH conditionsofESHactionis 8．0-8．5．37-45℃ optimum pH Atthe havesome same researchontheimmobilizationof time，we thecells．Wetaketheimmobilizedcellswhich as using