气道高反应性发生条件及机制探讨.pdfVIP

摘要 气道高反应性发生条件与机制的探讨 中文摘要 研究背景： 气道炎症和气道高反应性是哮喘的基本特征。支气管哮喘产生气道高反应性 机制的研究已经取得很大的进展，但其确切机制目前仍然没有明确，参与的可能 机制包括：Th细胞作用失衡；嗜酸粒细胞等多种炎症细胞、炎症介质、黏附分 子和细胞因子的作用；遗传因素；神经源性炎症；氧化应激状态等。国内外对气 道反应性的各个可能机制进行了广泛的研究，例如，研究发现小鼠可在无气道嗜 酸性粒细胞浸润的情况下出现气道高反应性；临床研究中鼻炎患者进行鼻变应原 激发后，下气道在没有接触变应原的情况下出现气道炎症和反应性增高。1989 年Gibson等首先报道的嗜酸粒细胞性支气管炎(EB)患者有气道嗜酸粒细胞增 高，但患者肺通气功能正常，无气道高反应性，峰流速(PEF)变异率正常，无 法诊断为支气管哮喘。EB是慢性咳嗽的主要原因，诱导痰和气道黏膜病理检查 表明，EB与哮喘一样，存在以嗜酸性粒细胞为主的多种炎症细胞浸润，但EB 为何缺乏气道高反应性?其原因仍然未明。本课题组一方面通过纤维支气管镜对 EB和哮喘患者的气道黏膜进行免疫病理比较，并应用比较蛋白组学探讨EB和 哮喘肺泡灌洗液中蛋白的差异表达，筛选出与气道高反应性、气流可逆性阻塞相 关的蛋白，并初步发现EB的气道炎症较哮喘轻且主要分布在中心气道，EB患 者常合并有变应性体质，如合并有变应性鼻炎、变应性皮炎、皮肤变应原测试阳 性等。 单纯变应性鼻炎无合并哮喘的患者进行鼻变应原激发后，下气道在没有直接 接触变应原的情况下出现气道炎症和反应性增高，变应性鼻炎可加重哮喘患者的 下气道症状，这些研究着重于上气道炎症对下气道的影响，但对于下气道变应原 激发后是否能引起上气道炎症变化及高反应性的研究极少报导，哮喘患者是否上 气道在没有直接接触变应原的情况下出现气道炎症和反应性增高?这对于研究 气道高反应性的发生条件和机制有很好的启发作用，也具有很重要的临床意义。 摘要 研究目的t 应用不同大小的变应原颗粒雾化小鼠，尝试建立具有明显的EOS气道炎症、 但无气道高反应性的BALB／e小鼠模型，并将该模型与哮喘模型进行病理学及蛋 白组学的比较，以筛选鉴定与气道高反应性、气流可逆性阻塞相关的蛋白，为进 一步研究气道炎症及气道高反应性的发生机制奠定基础；对小鼠气道不同部位进 行变应原激发，探讨远端气道在无变应原直接刺激的情况下的气道炎症和反应 性。 研究内容： 第一部分不同直径变应原对小鼠气道高反应性的影响及蛋白组学 的比较 分题1应用大颗粒变应原雾化建立无气道高反应性的嗜酸粒细胞性气道炎症 小鼠模型及与哮喘模型气道炎症的比较 方法：BALB／c雌性小鼠，分为3组，每组6~8只：大颗粒变应原雾化激发组(下 称实验组，雾化颗粒的平均中位直径8．6l，tm)、小颗粒变应原雾化激发组(下称 哮喘组，雾化颗粒的平均中位直径2．9I-tm)、生理盐水对照组(下称对照组)。 PARI LC TIA喷雾器雾化I％OVA15min激发；哮喘组第28、29、30天用PARI STAR喷雾器雾化I％OVA15min激发；对照组致敏、激发采用生理盐水。最后 一次激发24、48、72、96h后应用美国BUXCO公司的有创气道阻力与肺顺应性 检测系统(RC system)测定动物的气道反应性，并进行支气管肺泡灌洗观察气 道炎症情况。在末次激发24和96h后，检Nd,鼠的气道炎症程度，按照气道周 围EOS浸润的程度评0~4分，并观察肺实质的炎症情况。 结果：1．气道反应性的测定：末次激发24、48、72、96h后，各组RL均有随 Mch浓度升高而增加的趋势。哮喘组在各个浓度Meh的RL均高于实验组和对照 组，表明哮喘组的气道反应性高于实验组和对照组，实验组与对照组的气道反应 性差异在各个时问点均无统计学意义。 2．实验组和哮喘组肺泡灌洗液中巨噬细胞百分率显著低于对照组 (尸0．05)，而中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞百分率显著高于对照组 摘要 (氏0．01)。 3．末次激发72、96h后，实验组肺泡灌洗液中EOS比例逐步下降，表