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金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 The research on the metalloproteins’ SPRF 2005级生物技术　武闯金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 α-螺旋Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ亲水面上的酸性残基被去除以后，该螺旋就与血红素有更强的作用力，使血红素被更紧地夹在螺旋当中。 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 关于电子传递的速率。两个蛋白之间电子传递的速率主要取决于它们的碰撞数（collision num-ber），它主要由该反应的推动力（driving for-ce）所决定的。对电子传递作出贡献的是有效碰撞（effective collision）。 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 细胞色素b5和细胞色素c存在于人和各种生物体的细胞线粒体中,是呼吸链的电子传递蛋白,承担着电子传递功能,此呼吸链氧化还原反应,用来作为生物体制造ATP的“能源工厂”。 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 金属蛋白的结构-性质-反应-功能的研究 Company Logo Company LOGO 蛋白质 产生 生长 发育 衰老 死亡 在生命体系当中，蛋白质是生物功能的基础 生命体 TEX TEXT TEXT 大约1/3的蛋白是一些含金属的蛋白 含铁的血红素蛋白 血红素 蛋白肽链 铁离子 卟啉环 辅基(prostheticgroup) 蛋白框架(frame) 细胞色素b5（Cytochrome b5） 细 胞 色 素 b5 参与一系列重要的氧化还原过程 广泛存在于各种生物体的细胞线粒体中 是研究蛋白质电子传递，折叠与修饰很好的模型蛋白 与细胞色素C之间的电子传递可作为蛋白相互作用的模型 其结构和性质已得到了广泛的研究 一、细胞色素b5的组成和结构 细胞色素b5的结构已经被X射线和NMR深入地研究，具有很明确的结构 两个已有的细胞色素b5和细胞色素ｃ之间的结合模式---------Salemme模型和Brownian动力学模型:二者通过四对酸性残基和碱性残基间的静电作用形成蛋白质复合物。 Salemme模型：E44-K27、E48-K13、D60-K72、 丙酸根-K79 Brownian动力学模型：E48-K13、E56-K87、 D60-K86、丙酸上的羧酸基团-K72 二、细胞色素b5的性质和反应 研究的主要目的是去探索金属蛋白的SPRF。这里一个非常具有挑战性的问题就是要研究一个氨基酸或者特定的结构单元对蛋白质的性质和功能的影响。而将物理、化学的方法和分子生物学的技术结合，既是研究这个问题的一个非常好的方法，也是生物化学具有特定优势的研究方法。因此，研究者以细胞色素b5为对象，开展了蛋白质各位点的定点突变的研究:单点突变、双点突变、三点突变和四点突变。 3 血红素配体的残基 1 2 疏水腔中的一些疏水残基 蛋白表面带有带负电的残基 研究的三个层面 1、蛋白的热稳定性 细胞色素b5及其突变体蛋白的热失活 8.58 1620 559 5.3 71.8 E44/48/56A 4.63 1277 438 3.2 69.7 E48/56A 8.96 1529 528 5.3 72.7 E48A/D60A 0.82 1402 479 0.7 68.1 E44/56A 1.07 1357 464 0.9 68.3 E56AQ 1321 450 67.4 野生型 -0.53 1310 446 -0.3 67.1 E44A 2.48 1296 443 1.7 68.2 E44/48A 7.53 1336 460 5.1 71.6 E44/48/56A,D60A 9.62 1389 481 6.4 72.9 E48/56A,D60A 10.49 6.0 72.5 E43/44/48/56A,D60A 2.33 1713 585