第十六章基因表达的调控.pptVIP

16.2 原核基因表达的调控 操纵子 乳糖操纵子的表达调控 色氨酸操纵子的表达调控 16.2.1 操纵子(operon) 操纵子的提出 16.2.1.1 操纵子的基本组成 (1) 结构基因群 (2) 启动子 (3) 操纵区 （4） 调控基因 （5） 终止子 16.2.1.1乳糖操纵子的表达调控 1. 阻遏蛋白的负调控 2. CAP的正调控 16.2.1.2 色氨酸操纵子 1. 色氨酸操纵子的结构 2. 阻遏蛋白的负调控 乳糖操纵子的诱导 色氨酸是构成蛋白质的组分，一般的环境难以给细菌提供足够的色氨酸，细菌要生存繁殖通常需要自己经过许多步骤合成色氨酸，但是一旦环境能够提供色氨酸时，细菌就会充分利用外界的色氨酸、减少或停止合成色氨酸，以减轻自己的负担。细菌所以能做到这点是因为有色氨酸操纵子（trp operon）的调控。 合成色氨酸所需要酶类的结构基因群，受其上游的启动子Ptrp和操纵子ｏ的调控，调控基因trpR的位置远离P-ｏ-结构基因群，在其自身的启动子作用下，以组成性方式低水平表达其调控蛋白R，R并没有与ｏ结合的活性，当环境能提供足够浓度的色氨酸时，R与色氨酸结合后构象变化而活化，就能够与ｏ特异性亲和结合，阻遏结构基因的转录。 因此色氨酸操纵子属于一种负性调控的、可阻遏的操纵子（repressible operon），即这操纵子通常是开放转录的，有效应物（色氨酸为阻遏剂）作用时则阻遏关闭转录。细菌不少生物合成系统的操纵子都属于这种类型，其调控可使细菌处在生存繁殖最经济最节省的状态。? * * 细菌能随环境的变化，迅速改变某些基因表达的状态，这就是很好的基因表达调控的实验模型。人们就是从研究这种现象开始，打开认识基因表达调控分子机理的窗口的。 大肠杆菌可以利用葡萄糖、乳糖、麦芽糖、阿拉伯糖等作为碳源而生长繁殖，当培养基中含有葡萄糖和乳糖时，细菌优先利用葡萄糖，当葡萄糖耗尽，细菌停止生长，经过短时间的适应，就能利用乳糖，细菌继续呈指数式繁殖增长。 乳糖对?－半乳糖苷酶的合成有诱导作用。 葡萄糖对?－半乳糖苷酶的合成有抑制作用。 这种典型的诱导现象，是研究基因表达调控极好的模型。针对大肠杆菌利用乳糖的适应现象，法国的Jocob和Monod等人做了一系列遗传学和生化学研究实验，于1961年提出乳糖操纵子（lac operon）学说。 下面就以乳糖操纵子为例子说明操纵子的最基本的组成元件（elements）。 P S1 S2 S3 启动子 O Promoter 调控序列 结构基因 操纵子（operon） 结合RNA聚合酶 表达功能蛋白 ? 11/50 操纵子（operon）:原核生物的转录单位 操纵基因 Operator 操纵子中被调控的编码蛋白质的基因可称为结构基因(structural gene, SG)。一个操纵子中含有2个以上的结构基因，多的可达十几个。 乳糖操纵子含有ｚ、ｙ和ａ3个结构基因。 启动子(promoter, P)是指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。操纵子至少有一个启动子，一般在第一个结构基因5＇侧上游，控制整个结构基因群的转录。 　　 操纵区（operator）是指能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列，常与启动子邻近或与启动子序列重叠，当调控蛋白结合在操纵子序列上，会影响其下游基因转录的强弱。 　　以乳糖操纵子中的操纵区为例，其操纵区（o）序列位于启动子（p）与被调控的基因之间，部分序列与启动子序列重叠。 调控基因(regulatory gene)是编码能与操纵序列结合的调控蛋白的基因。调控蛋白有： 　A 阻遏蛋白(repressive protein)：与操纵区结合后能减弱或阻止其调控的基因转录，其介导的调控方式为负调控 B 激活蛋白(activating protein)：与操纵区结合后能增强或起动其调控的基因转录，所介导的调控方式为正调控 　　例如在乳糖操纵子中，调控基因lac I位于Plac邻近，编码产生调控蛋白R。 在环境没有乳糖存在的情况下，R能特异性与操纵区ｏ紧密结合，从而阻止利用乳糖的酶类基因的转录，所以R是乳糖操纵子的阻遏蛋白； 当环境中有足够的乳糖时，乳糖与R结合，失去与操纵区特异性紧密结合的能力，从而解除了阻遏蛋白的作用，使其后的基因有转录的可能。 在这过程中乳糖就是诱导剂，与R结合起到去阻遏作用，诱导了利用乳糖的酶类