磁性复合微粒在mRNA纯化中的应用硕士学位论文.docVIP

西 北 大 学 硕 士 学 位 论 文 题目： 磁性复合微粒在mRNA纯化中的应用 摘 要 磁性复合微粒是由高分子或无机材料与磁性超细粉末（如铁的氧化物、铁、钴、镍等金属）构成的具有超顺磁性的胶态材料。磁性复合微粒可在外加磁场中被快速分离，反复操作无磁记忆性。此外，通过物理吸附或其表面功能基团（如羧基、羟基、氨基等）的作用，可将抗体、酶、核酸、小分子探针及药物等分子固定在其表面。基于磁性复合微粒的超顺磁性以及表面生物分子可修饰的特点，磁性复合微粒已被广泛用于细胞学、免疫学、分子生物学、临床诊断与治疗等研究领域。 生物样品中mRNA的分离纯化是分子生物学研究的前提和关键环节。以磁性复合微粒为载体的mRNA纯化方法高效、快捷，获得的mRNA分子完整。国外已有相关产品，但售价昂贵，难以普及，国内在此方面的研究与开发还较为落后。本研究以不同组成的微米级磁性复合微粒为材料，将oligo dT 通过共价作用或链亲和素-生物素的相互作用固定在磁性复合微粒的表面，并以此为载体开展了从不同动、植物组织中纯化mRNA的研究。 将表面硅烷化含氨基末端的磁性Fe3O4微粒以苯二异硫氰酸酯活化，进而将氨基标记的oligo dT 20共价偶联在其表面，并系统开展了从不同动、植物组织总RNA中提取mRNA的研究。结果表明：1 mg磁性复合微粒可偶联氨基标记oligo dT 20 的量在 0.85 n