PM2.5暴露对大鼠清除肺炎克雷白杆菌的影响及其机制.pdfVIP

中文摘要 PM2．5暴露对大鼠清除肺炎克雷白杆菌的影响及其机制 摘 要 目的：研究表明可吸入颗粒物的增加可使肺炎的住院率增加，这在老 年人及儿童中尤为明显。肺炎克雷伯杆菌是条件致病茵，是老年性肺炎主 要致病菌之一。本研究建立PM2．，暴露大鼠模型后予以肺炎克雷伯杆菌感 染，通过检测PM2．5暴露前后大鼠临床评分、肺脏病理、BALF中细胞计 数、细菌菌落计数及细菌感染率，探讨了PM2．5暴露对大鼠肺炎克雷伯杆 菌感染的易感性和细菌清除率的影响；通过电镜检测大鼠气管粘液纤毛结 系统细菌易感性增加的机制，以期对PM2．5暴露导致的肺部感染性疾病的 诊治提供理论依据。 方法：清洁级雄性SD大鼠86只，按随机数字表法分为4组：①空 克感染组；肺克感染指以肺炎克雷白杆菌标准菌株悬液浓度为 1．0xl 内滴入。各组动物根据评分标准进行I临床评分，并分别于l天、7天处死 部分动物，取材后测定相应指标。 10％水合氯醛腹腔注射麻醉，股动脉放血处死动物并收集血液离心， 中下叶，10％中性福尔马林溶液固定，常规石蜡包埋，切片，HE染色， 观察肺组织的病理形态变化并进行评分，对整个肺左叶行支气管肺泡灌 洗，取支气管肺泡灌洗液，部分送细菌培养进行细菌菌落计数，部分离心 后细胞沉淀悬浮于200“l生理盐水中，应用光学显微镜进行细胞计数。并 取上段气管用扫描电镜观察气管黏膜上皮的细胞构成、纤毛情况。 结果： 染组l天的临床表现评分中位数和四分位数间距分别为4(1)、5(2)、5(1)、 中文摘要 (P0．01)。空白对照组在第7天的临床评分较第1天下降有统计学意义 床评分均无明显改善(PO．05)。 照组、NS+肺克感染组和PM2．5+NS组不同时间上动物死亡率无明显差异 (PO．05)。 PM2．5+肺克感染组肺组织病理分级高于空白对照组，均有统计学差异 分明显升高有统计学意义(P0．05)。所有组第7天时较第1天的病理分级 变化均无统计学意义(PO．05)。 4电镜气道粘液纤毛的改变：PM2．5+NS组染毒1d时可见大鼠的气管纤毛 呈杂乱、粘连、成束分布，摆动不良的外观，可见到其下的微绒毛。染毒 7d时大鼠气管纤毛的粘连和倒伏状态更加严重，纤毛变短不规则，稀疏部 分脱落，部分视野甚至纤毛缺失，可见新生的纤毛柱状上皮细胞。空白对 照组大鼠气管柱状上皮纤毛的结构完整排列规则。 5 中文摘要 空白对照组不同时间细胞总数及分类变化没有统计学差异(PO．05)。 空白对照组不同时间点IL一6、TNF．a含量无明显变化。 7 天时细菌培养的阳性率分别为25％、87．5％，PM2．5+肺克感染组明显高于 NS+肺克感染组(Po．05)。两组组内不同时间点比较时细菌培养的阳性 率均没有显著差异(PO．05)。 8 cfu／m1)的中位数和四分位数间距分别为： l天时细菌菌落计数(Ioglo cfu／m1)3．97(3．31)、 1．89(2．48)、1．00(2．02)；7天时细菌菌落计数(Ioglo 间点比较时均没有明显的差别(P0．05)。 结论： 1 PM2．，暴露可以导致大鼠肺部的炎症反应及气管的粘液纤毛系统功能受 4口 狈o 2PM2．5暴露增加大鼠对肺炎克雷白杆菌感染的易感性；损害大鼠肺对肺 炎克雷白杆菌的清除；加重感染所致的炎症反应。 3PM2．5暴露使大鼠对肺炎克雷白杆菌的易感性增加的机制涉及支气管的 粘液纤毛系统功能受损以及炎症因子的相互作用。 关键词：PM2．5．感染：肺炎克雷白杆菌；纤毛系统；白细胞介素6； 肿瘤坏死因子．a．；易感性；细菌清除 英文摘要 TheEffectsandMechanismof to onthe PM2．5 Exposure