乳牛子宫内膜抗菌肽BNBD5基因的克隆及其原核表达.pdfVIP

中国兽医科学 2009，39(O6)：538—542 ChineseVeterinaryScience 中图分类号：S859．797：Q 786 文献标志码：A 文章编号：1673—4696(2009)06—0538～05 乳牛子宫内膜抗茵肽 BNBD5基 因的克隆 及其原核表达 ， 王桂荣 严作廷 ，王东升。，米宝明 ，崔 燕 (1．甘肃农业大学 动物医学院，甘肃 兰州 730070；2．中国农业科学院 兰州畜牧与兽药研究所 ，甘肃 兰州 730050) 摘要 ：为研发防治乳牛子宫内膜炎的抗菌肽生物制剂 ，根据 已发表的牛抗茵肽基 因序列设计 了1对引 物，用试剂盒提取乳牛新鲜子宫内膜总RNA，经 RT—PCR扩增，将克隆的抗茵肽 BNBD5基因全长编码区的 cDNA连接到原核表达载体 pET30a中，经 IPTG诱导原核表达 ，通过 Western—blot检测融合蛋 白BNBD5 的表达水平。结果表明，RT～PCR扩增出的cDNA 片段长 138bp，编码