Lgr6基因质粒转染人脐带间充质干细胞对小鼠皮肤创面的修复作用.pdfVIP

广东医学 2013年8月 第34卷第 16期 GuangdongMedicalJournal Aug．2013，Vo1．34，No．16 · 2443 · Lgr6基因质粒转染人脐带间充质干细胞对 小鼠皮肤创面的修复作用 石胜军，陈广平，贾思远 南方医科大学珠江医院烧伤科 (广州510282) 【摘要】 目的 探讨富含亮氨酸重复序列的G一蛋白偶联受体6(Lg16)基因与人脐带间充质干细胞(hUC— MSCs)构建的组织工程细胞是否更快更好地修复小鼠皮肤创面。方法 体外培养hUC—MSCs，构建pIRES2一 EGFP—Lgl6表达载体，将表达Lgr6的质粒转染到hUC—MSCs中，然后种植于重症联合免疫缺陷小鼠背部全层皮 肤烧伤创面(实验组)，同时设种植转染空载质粒的hUC—MSCs作对照组。于术后7、14、21d观察创面愈合率，并 做HE染色和免疫组织化学。结果 hUC—MSCs能正确表达Lgr6靶蛋白，术后7、14、21d实验组创面愈合率均明 显高于对照组。HE染色显示，实验组新生表皮较厚 ，细胞层数较多且分层较明显，皮肤附属器增 多，总体创面愈 合情况均较对照组好；在再生表皮和真皮层中均发现有绿色荧光蛋白标记的细胞 ，且部分细胞表达人源性角蛋 白 14。结论 Lgr6基因转导入 hUC—MSCs可应用于修复小鼠皮肤创面，修复效果较好。 【关键词】 人脐带间充质干细胞；Lgr6基因；皮肤创面；组织工程 Skin woundsrepairmenwith Lgr6genetransfectedhumanumbilicalcordmesenchymalstem cellsinmice． SHI Sheng一 n，CHENGuang—ping，J[ASi—yuan．BurnSurgery，ZhujiangHospital，SouthernMedicalUniversity，Guang- zhou510282，China Correspondingauthor：JIAS—yuan 【Abstract】 Objective Toinvestigatetheefficacyoftissueengineeringleucine—richrepeat—containingGpro— tein—coupiedreceptor6(Lgr6)geneandhumanumbilicalcordmesenchymalstemcells(hUC—MSCs)onskinwounds repairmeninmice．Methods ConstructedpIRES2一EGFP—Lg．5expressingvectorwastransfectedintohUC—MSCsin vitro．ThetransfectedhUC—MSCswereimplantedonthebackoffull—thicknessskinburnmicewithseverecombinedim— munodeficiency(SCID)，andblankhUC—MSCswereappliedincontrolgroup．Onthe7th，14thand21stdayafterim— plantation，theareapercentageofwoundhealingwascalculated，whileHE stainingandimmunohistochemistrywereper— formedforpathological observation．Results Lgr6wassuccessfullyexpressedintransfectedhUC—MSCs．Theareaper— centageofwoundhealingwassignificantlyhigherinexperimental groupthanthatincontrolgroup．Thickerskintissues， morecelllayersandstratification，increasedskinappendages，andbetteroverallwoundhealingwasobservedinexpefi— mentalgroupthancontrolgroup．Greenfluorescentprotein(GFP)cellswereobservedintheregeneratingepidemrisand demr is，someofwhichhuman—derivedcytokeratinl4(CK14)wasexpressed．Conclusion ThehUC—