榄香烯对肝癌细胞株中抑癌基因甲基化影响的实验的研究.pdfVIP

2 榄香烯对肝癌细胞株中抑癌基因甲基化影响的实验研究 中文摘要 榄香烯对肝癌细胞株中抑癌基因甲基化影响的实验研究 中文摘要 目的：研究榄香烯对肝癌细胞株HepG2 和QGY7703 细胞增殖、凋亡、周期的影 响，明确榄香烯对两种肝癌细胞抗肿瘤作用；检测榄香烯处理前后的两种细胞中抑癌 基因GSTP1、RIZ1 、HAI-2 、SLIT2 甲基化状态，探讨榄香烯是否具有逆转异常甲基 化作用，并以期筛选出具有肝癌特异性的抑癌基因。 方法：采用不同浓度的榄香烯处理肝癌细胞株HepG2 和QGY7703 细胞，用MTT 法检测榄香烯对两种细胞抑制增殖的作用，流式细胞术检测榄香烯诱导细胞凋亡的作 用及对细胞周期的影响，用 MSP 法检测榄香烯对处理前后的两种细胞中抑癌基因 GSTP1、RIZ1 、HAI-2 、SLIT2 甲基化的影响。 结果：不同浓度的榄香烯作用肝癌细胞株HepG2 和QGY7703 细胞48h 后，显示 出对两种肝癌细胞明显抑制增殖作用，对两种肝癌细胞的 IC50 分别为（69 ± 6.3 ） µg/ml 和（63 ± 2.1 ）µg/ml；与对照组比较差异有统计学意义 （P0.05 ）；两种肝癌 细胞未经榄香烯处理时自然凋亡率分别为（6.37 ±0.15 ）%和 （7.40 ±0.66 ）%，榄 香烯在10、20 、30µg/ml 浓度下对两种肝癌细胞的凋亡率分别为（20.83 ±0.25 ）%和 （12.50±0.61 ）%、（27.7 ±0.75 ）%和 （32.77 ±2.30 ）%、（37.1 ±0.46 ）%和 （48.27 ±1.23）%，各组间差异有明显统计学意义（P0.05 ）；在10、20 、30µg/ml 浓度下， 榄香烯能使两种肝癌细胞阻滞于 S 期，G1 期细胞百分比分别由（68.71 ±0.69 ）%和 （65.56 ±0.41 ）%下降到（60.81 ±0.38 ）%和 （53.00 ±0.15 ）%，S 期细胞百分比分 别由（28.85 ±0.18 ）%和（27.04 ±0.45 ）%增加到（36.81 ±0.36 ）%和（38.43 ±0.60 ）%， 与对照组比较差异均有统计学意义 （P0.05 ）；GSTP1、RIZ1 、HAI-2 基因在肝癌细 胞株HepG2 和QGY7703 两种细胞中均呈完全甲基化表达，SLIT2 基因呈部分甲基化 表达，其中经过浓度 40µg/ml 和 160µg/ml 榄香烯和 5-Aza-dc 处理，GSTP1 基因在 QGY7703 细胞中出现了未甲基化状态。 结论： 1.榄香烯对肝癌细胞株HepG2 和QGY7703 细胞有明显的抑制增殖作用，诱导其 I 中文摘要 榄香烯对肝癌细胞株中抑癌基因甲基化影响的实验研究 凋亡，并且阻滞两种肝癌细胞从S 期进入G /M 期，呈浓度依赖性。 2 2.榄香烯具有逆转抑癌基因异常甲基化作用，但具有基因和细胞特异性。 3. GSTP1、RIZ1 、HAI-2 基因甲基化状态具有很好的肝癌特异性，可建立甲基化 谱，可较好的区分肝癌与非肝癌。 关键词：榄香烯；抑癌基因；甲基化 研究生：黄洪军 指导老师：江勇 II Experimental study of elemene on methylation of tumor suppressor ge