斜纹夜蛾免疫相关蛋白βGRP的鉴定及免疫功能初探.pdfVIP

斜纹夜蛾免疫相关蛋白 pGRP的鉴定及免疫功能初探 专 业：动物学 硕士生：俞鸣铗 指导老师：张文庆教授 摘要 昆虫在自然界中分布非常广泛，在生物界中占有重要的地位。昆虫无获得性 免疫系统，在长期的进化过程中，昆虫依靠高效的先天免疫系统对付外源微生物 的入侵。昆虫体内的模式识别分子能识别外源微生物体表特有的分子构造，例如 细菌细胞壁的脂多糖、脂磷壁酸、肽聚糖等，及真菌细胞壁的B．1，3一葡聚糖。 这些模式识别分子在结合上外源微生物后，能快速启动昆虫体内的一系列免疫反 应，如：血细胞的噬菌作用、形成结节构造、包囊作用、黑化作用及激活抗菌多 肽基因的表达等。 litura)为研究对象，鉴定了斜纹夜蛾免疫相关 本文以斜纹夜蛾(Spodoptera 蛋白一13—1，3一葡聚糖识别蛋白，并对其功能做了初步的分析。本实验用大肠杆菌 对斜纹夜蛾进行诱导，可以提高斜纹夜蛾血淋巴中免疫蛋白的含量。提取经大肠 杆菌诱导的斜纹夜蛾血淋巴SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，WesternBlot结果表 明，斜纹夜蛾的血淋巴中含有B一1，3一葡聚糖识别蛋白，其分子量约为70kD。用 亲和沉淀法从斜纹夜蛾血淋巴中分离纯化了6．1，3-葡聚糖识别蛋自，并进行了 初步的生物功能研究。研究发现，纯化的B一1，3一葡聚糖识别蛋白样品对大肠杆 菌TGl具有很好的凝聚效果：而在加入昆布多糖后，降低了B．1，3一葡聚糖识别 蛋白对大肠杆菌的凝聚能力。酚氧化酶活性检测结果显示，在13-1，3-葡聚糖识 别蛋白和昆布多糖共同存在时，能显著提高血淋巴中酚氧化酶的活性。此结果表 明，B一1，3一葡聚糖识别蛋白对酚氧化酶原的激活必须有13-1，3-葡聚糖的存在。 对p一1，3一葡聚糖识别蛋白的研究表明B．1，3．葡聚糖识别蛋白在斜纹夜蛾的免疫 反应中起着重要的作用，它能识别外源病原体体表的特异分子，并激活斜纹夜蛾 的先天免疫系统。 关键词：斜纹夜蛾先天免疫D—l，3一葡聚糖识别蛋白亲和沉淀酚氧化酶 Ⅱ researchofan Identificationandfunction in the immunity·-associatedprotein-pGRP Speciality：Zoology Name：YU Ming-jia ZHANG Supervisor：ProfessorWen—qing Abstract have Insectsno reactionand ontheirinnate adaptiveimmunity mainlydepend tOdefensetheinvasionof theirimmunereactionsare immunity microorganisms，SO effective．In are the oftheinsectsthere very hemolymph